時間:2023-03-07 14:58:19
序論:好文章的創作是一個不斷探索和完善的過程,我們為您推薦十篇檢測鑒定報告范例,希望它們能助您一臂之力,提升您的閱讀品質,帶來更深刻的閱讀感受。
在研究基因功能的過程中,不可避免地要研究基因的調控機制,而基因的表達產物復雜且難以對其定量和定性,要在細胞生長周期的任意點了解細胞的基因表達產物更是非常困難。但報告基因分析系統的發現給基因調控與表達的研究帶來了新的希望。近年來,報告基因系統的研究取得了快速的發展。報告基因是一種編碼某種易于檢測蛋白質或酶的基因,通過它的表達產物來標定目的基因的表達調控,因此,對真核基因調控的了解可以不通過直接測定調控元件調節轉錄速率的能力,而是把順式調控元件與報告基因的序列連接起來,在基因轉錄的過程中測定報告基因轉錄產物的表達量,從而判斷相應的順式作用元件的調控能力。作為報告基因必須具備以下特點:(1)由原核基因編碼的基因產物必須區別于轉染前真核細胞內任何相似的產物;(2)細胞內其他基因產物不會干擾報告基因產物的檢測;(3)報告基因編碼產物的檢測應該快速、簡便、靈敏度高、重復性好。該技術的主要優點是靈敏度高、可信性大及檢測方便且適合大規模檢測,目前已廣泛應用于啟動子分析、監控轉基因及其表達、細胞的信號轉導與藥物的篩選等多種細胞事件[13]。熒光素酶(LUC)報告基因來源于北美螢火蟲,能催化螢火蟲的氧化性羧化作用,同時發射出光子,可被光度計捕獲定量。LUC的分析具有快速、方便、線性較好等優點,正成為最廣泛使用的報告基因。pGL3系列的質粒就是帶有LUC報告基因的質粒載體,我們可以利用這一系列的工具載體研究果蠅中基因的表達調控方式,其中pGL3Control帶有SV40的啟動子和增強子。SV40是一種猴病毒, 它的增強子/啟動子區域可使其在大多數細胞株中有高度的組成性表達,因而廣泛用于構建真核基因的表達載體,因此pGL3Control可作為檢測體系中的陽性對照。但由于SV40啟動子在果蠅S2細胞中不表達,所以我們將果蠅actin 5C 蛋白的啟動子(pac)[4]構建到質粒pGL3Basic中,得到了高表達LUC的重組載體pGL3pac。這一質粒的構建可為研究果蠅中基因的調控方式奠定基礎,同時也可為研究其他報告基因在不同細胞中的表達提供借鑒作用。
1 材料和方法
1.1 菌株、質粒及試劑大腸桿菌DH5α(作者所在實驗室保存),質粒pGL3Basic(Promega公司),pAc5.1/V5His/LacZ(Invitrogen公司),限制性內切酶XhoⅠ、HindⅢ及T4連接酶、DNA聚合酶(TaKaRa公司),小量膠回收試劑盒(TaKaRa公司),中量質粒抽提試劑盒(Invitrogen公司),LUC檢測試劑盒(Promega公司),S2細胞Schneider培養基(Invitrogen公司),胎牛血清(Gibco公司)。
12 方法
1.2.1 pac啟動子的獲得 以pAc5.1/V5His/LacZ質粒為模板進行PCR擴增。上游引物5′GCGCCTCGAGCTTCAAGGAATTAATTCTATATTCT3′,下游引物5′GCGCAAGCTTGGTCTCTGGATTAGACGACT3′(劃線部分分別為XhoⅠ和HindⅢ酶切位點)。PCR反應參數為:95 ℃ 5 min;94 ℃ 1 min,60 ℃ 1 min,72 ℃ 2 min,共30個循環; 72 ℃延伸10 min。
1.2.2 重組質粒的構建鑒定與中量抽提純化 PCR產物分別經XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后進行瓊脂糖凝膠電泳,割膠回收酶切片段,與同樣經酶切、割膠回收的pGL3Basic質粒于16 ℃連接過夜,連接產物轉化大腸桿菌DH5α,并涂布于含氨芐青霉素(終質量濃度為50 mg?L-1)的固體培養基上,37 ℃過夜培養。挑陽性克隆提取質粒,酶切和測序鑒定,鑒定正確的質粒經中量質粒抽提試劑盒提取純化。
1.2.3 S2細胞培養及瞬時轉染 S2細胞由本實驗室凍存,使用Schneider培養基,補以10%胎牛血清。S2細胞培養在28 ℃無CO2培養箱中,根據其生長狀態,按一定比例每3 d傳代1次。待細胞生長狀態良好時進行瞬時轉染分析。轉染時在12孔板中接種1×106個細胞,加入1 ml含10%胎牛血清的Schneider培養基,置28 ℃無CO2培養箱中培養6~16 h[細胞生長至對數生長期達(2~4)×106ml-1],在1.5 ml Eppendorf 管中準備以下試劑:溶液A,12 μl 2 mol?L-1 CaCl2,5 μg重組質粒,1 μg pAcLacZ質粒,加入雙蒸水至總體積為100 μl,混勻待用;溶液B,100 μl2×HBS。將A溶液緩慢加入B溶液中,輕輕混勻,室溫放置30 min,以形成Ca3PO4DNA復合物。將Ca3PO4DNA復合物逐滴加至細胞上,混勻后置28 ℃無CO2培養箱中繼續培養,24 h后用含10%胎牛血清的Schneider培養基給細胞換液。細胞轉染48 h后裂解細胞,先吸去培養液,用PBS洗2遍,在每個培養孔中加入200 μl Reporter lysis buffer,保證充分覆蓋細胞,凍融1次以確保細胞裂解,將細胞裂解液移至1.5 ml Eppendorf管中,振蕩10~15 s,離心(12 000×g,2 min,4 ℃),轉移上清于新管。制備好的細胞裂解液可用于測定或貯存于-70 ℃備用。
1.2.4 LUC和β半乳糖苷酶(βgal)活性測定 取制備好的細胞裂解液進行LUC和βgal活性的測定。LUC活性測定前取20 μl平衡至室溫的細胞裂解液,加入80 μl LUC底物,迅速混勻,置光度計中,記錄讀數。βgal活性測定根據分子克隆的方法,在每個用于測定轉染細胞裂解物的Eppendorf管中加入100×Mg2+ 3 μl、1×ONPG 66 μl、細胞裂解物30 μl、0.1 mol?L-1Na3PO4 201 μl,混勻。置37 ℃保溫30 min,以500 μl 1 mol?L-1 Na2CO3終止顯色反應。置酶標儀上,在波長420 nm處讀光吸收值來表示βgal的活性,以共轉化的βgal活性作為內源對照,以/βgal活性的值為系數,比較各組在轉化效率相同時LUC活性的相互關系。以沒有任何插入片段時pGL3Basic的LUC活性為1,比較加上插入片段pac啟動子后的LUC活性增加的倍數,即LUC的相對活性,以反映LUC基因表達的相對水平。
2 結
果
2.1 重組載體的構建鑒定與純化以pAc5.1/V5His/LacZ質粒為模板,通過上游引物和下游引物PCR擴增獲得pac啟動子2 500 bp基因片段(圖1),用XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后克隆到載體pGL3Basic中(圖2)。提取重組陽性質粒,XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后得到2 500 bp的基因片段(圖1)。經測序鑒定,閱讀框架不變。鑒定完成的重組質粒經過質粒中量抽提試劑盒提取純化,得到符合轉染所需的高純度高濃度的重組質粒pGL3pac,經測定其260 nm的OD值,計算得到其濃度為0.99 μg?μl-1,A260 nm/A280 nm為1.81。
2.2 S2細胞的瞬時轉染分析轉染結果顯示,pGL3Basic和pGL3Control中LUC的相對活性無明顯差異,提示SV40啟動子在果蠅S2細胞中不表達或低表達。而pGL3pac中插入了pac啟動子,LUC的相對活性明顯增高。pGL3pac在果蠅S2細胞中LUC的活性是pGL3Basic LUC活性的近2.7萬倍。見表1。表1 瞬時轉染后各組分酶活性值
3 討
論
LUC是現在常用的一種報告基因,因其無放射性、檢測快、靈敏度高、半衰期短、線性好等特點而得到廣泛的應用。我們構建了pGL3pac這一重組質粒,使得在果蠅S2細胞中能夠高表達LUC,為進一步的實驗提供了一個好的工具。首先,它可作為基因啟動子分析研究中的陽性對照,通過與該重組質粒的轉染結果比較,從而判定不同順式作用元件對轉錄的影響。其次,我們可以將目的基因某一區域的啟動子元件插入到重組質粒pGL3pac啟動子的上游或下游,通過LUC表達量改變的放大作用,進一步分析這些啟動子元件的生物學作用,找到在轉錄過程中起到關鍵作用的核心啟動子序列。在此基礎上,我們還可以了解特定的反式作用因子對基因表達的影響。再次,還可以將目的基因自身的5′端或3′端的UTR序列插入到LUC基因的上下游,通過檢測LUC的水平,為翻譯水平的調控提供依據。在實驗過程中,有很多方面值得我們注意。第一,在重組質粒利用中量試劑盒抽提純化時,想得到濃度高的產物,應注意在菌液的培養量和培養時間上進行調整。因實際環境的不同,按照操作說明所示的條件往往難以得到足夠的質粒量,通過增加培養的菌液量和延長培養時間可取得很好的效果。由于所得的質粒是細胞轉染所需,故在抽提純化時應特別強調無菌的原則。第二,在轉染實驗中,重組質粒pGL3pac必須共同轉染表達另外一帶有報告基因的質粒以衡量轉染效率。我們選擇了pAcLacZ,該質粒含lacZ基因,能夠表達βgal,利用βgal水解底物ONPG的能力計算出βgal的活性,以此作為內源對照衡量不同組分的轉染效率。這個質粒與目的質粒的轉染比例對于結果有很大的影響。因βgal的活性在0.2~0.8之間符合線性范圍,所以可根據這一要求摸索合適的轉染比例,通過實驗可得出兩者在5∶1濃度比時較合適。另外,還可以選擇帶有其它報告基因的質粒載體,如phRL是一種帶有海腎熒光素酶(RLUC)報告基因的質粒載體,如果選擇phRL作為共轉質粒則可通過在一管細胞裂解液中先后加入不同的底物,用同種儀器測定酶的活性即可,因其測定的兩種酶的活性在同一數量級而且減少實驗步驟,使實驗數據更加可靠,實驗過程更加簡便[5]。第三,我們是通過瞬時轉染得出結論,為排除一些因素的影響,轉染實驗必須重復3或4次,本實驗的轉染數據即是3次實驗的平均值。在實驗中我們選擇了pac替代pGL3Control中的SV40啟動子,主要是因為果蠅actin 5C蛋白組在果蠅體內為組成性表達且不需誘導,因此,利用pac作為替換啟動子,不僅能產生較好的效果而且可簡化實驗操作。這一質粒的構建不僅為我們在細胞水平利用報告基因系統研究果蠅中基因的表達調控方式提供工具載體,而且它的構建方法提示我們可通過相同的途徑構建適合轉染不同類型細胞的帶有報告基因的質粒載體,作為相應研究的基礎。
[參考文獻]
[1]LOUISE H. Reporter gene technology:the future looks bright [J].Biochem Pharmacol,1999,58:749757.
[2]GAMBHIR S S,BARRIO J R,HERSCHMAN H R,et al. Assays for noninvasive imaging of reporter gene expression [J]. Nucl Med Biol,1999,26:481490.
建筑測量頂崗實習報告一
秋風送爽,歲月流金,轉眼又到一年開學時,我們_屆的學生已經成為學長學姐了,開學的第三四周學校安排了我們班測量實習。現在為期兩周的測量實習結束了,雖然實習只有短短的兩周時間,準確的說只有十來天的時間,但是我們在這兩周也就是十幾天的實習過程中,學到了很多的東西,我們二小組成員的每一個人都收獲很大。以下就是我對本次實習的一些心得:
實習使我們鞏固了以前課堂上所學到的知識并且對以前的零碎的測量知識有了綜合應用的機會。使我們對控制測量和地形圖測繪過程的整體有了良好的了解及怎樣放樣也有了一定的掌握,對儀器的操作也更加嫻熟了。
這次的實習使我收獲了很多,比如我通過實習能更熟練的使用水準儀、經緯儀等測量儀器與工具,并能快速的架好儀器進行測量工作;較好的掌握了導線控制測量、地形圖測繪的基本方法,很好的鞏固了理論教學知識,提高了實際操作的技能。原先老師在課堂上講解的測量知識也在實踐中得到應用,并發揮了重要的作用,從而相互對照,將我的測量知識和測量水平提高了不少,同時在這實習中讓我再次認識到實習的團隊精神的重要性:每人的一個粗心,一個大意,都可能直接使我們一個上午的工作甚至一天的工作都白費,如果我們都畢業了在工作單位還是這樣的大意,這樣會直接影響工程的進度,甚至是帶來一生都無發彌補的損失。
一次測量實習要完整的做完,但靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的,只有小組的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成,這次測量實習培養了我們小組的分工協作能力,增進了大家感情。雖然有的時候我們會因為一些實習中的自己的想法和大家吵的耳紅面赤,但是大家最終的想法還是一致的,都是想把這次實習完成的更加完美。
我們小組成員在實習中的都付出了努力,最后很好的完成了這次的實習!
實習開始的第一天,我們先去了教室集中,聽了我們測量指導老師的講解,實習的小組人員安排,實習中的一些要注意的事項以及兩周的實習任務安排,讓我們大致的了解了實習安排和實習任務!隨后由于實驗樓儀器保管老師不在,暫時拿不到儀器,要第二天才能拿到儀器。指導老師只能叫我們幾個組的成員先去踏勘選點。我們二組也聽從了老師的安排,花了一個下午的時間去勘定了12個選點。
我們小組勘定了我們小組要勘的點后,大家就一起商量了一下明天我們測量的一些細節。
第二天上午可以領儀器了,我組在儀器室領了儀器之后,來到我們昨天勘定的一號點準備開始我們的第一天的實習了!
這天的上午,我們領來儀器后并沒有很快的開始測量,我們而是先對儀器進行了檢查以及熟悉了下儀器,對儀器各個部件及功能又進行進一步的認識,每個人都試著自己獨立完成架儀器的操作。我們是用經緯儀用測回法進行測量。
下午我們正式開始了測量實習,今天的任務是完成我們測區范圍內各個內角的測量。通過上午對儀器的熟悉,我們很快的在各個點架好儀器進行測角工作。測量過程中,并沒有一帆風順,我們遇到了一些問題,使我們測出來的角度有偏差。我們并沒有放棄,第一次的測量出現了這個問題,我們小組成員進行了討論,分析了出現問題的原因,之后我們又在各個點重新架好儀器,這次我們很細心的測量并很好的完成了測角的工作。五點多了,我們才完成了今天的測角工作。
第一天的測量不是很順利,中間出現的問題是我們在測量工作中不注意就常常會發生的,這個小小的問題使我們第一次的測量結果出現錯誤。這次的問題也讓我們認識到在進行測量工作時一定要細心,認真仔細的去做!
測量實習的第二天,我們是進行了各控制點的間距的測量,借鑒第一天的測量工作中出現的問題,我們今天打起十分的精神,認真細心的去做,一次就很準確的完成了控制點的間距的測量!我們小組的每個人都感到十分欣慰,這是一種進步。
第三天外面下著雨,我們沒辦法進行測量工作,我們在寢室回顧了兩天的測量時的一些細節,出現的問題。并翻出書本把一些遺忘的知識進行了回顧!還一起探討了接下去的工作怎么進行!
第四天我們進行了各控制點之間的夾角的測量,我的工作就是把其他成員的測量出來的數據記錄在紙上。測量過程中每個人都很積極的做各自分配到的工作。
他們把測出的數據記錄下來,我按照數據進行地形圖的繪制,一開始還真不知道如何把它繪制好,繪制的時候總是出現各種各樣的問題。之后測量指導老師給我們講解了繪圖的的方法以及測量的人應該注意的事項。
在老師的指導下我明白了繪制的方法及一些注意點,我按照指導老師教的方法進行繪制,這次繪制出來的比一開始要好了很多,我很快的就熟悉了繪制地形圖,他們測一組數據,我馬上就將這組數據繪制到圖上,有時們的數據我在圖上繪制時發現不對了,就對現場進行查看,分析是我繪圖出現了問題還是他們測量出現了問題。當發現我繪圖時并沒有出現什么問題,我就把他們測出的數據出現的問題向他們指出,他們便很快的進行了對出現問題的點進行重新的測量!又有時我不能明白他們測的數據對應的點時,他們就對我細心的指點,我繪圖出現了問題,他們也能很好的指出了。
接下來的幾天都是測繪地形圖,在大家的努力下我們比預計的時間提前了一天完成。
很快的我們就開始了繪圖,我們先在圖上設計了十二個控制點,代表我們要在圖紙上需要的畫圖范圍,這樣才能在圖紙上繪出其他需要標注的各個建筑物。
我們先是用老師選定的幾個基礎點,然后推算出了其他的十二個點的坐標,和各點到已知點的距離,和各點的方位角。這些東西搞完了過后才能根據我們測出的數據以及算出來的東西畫出我們需要的圖紙。所以我覺得繪圖是整個測量實習過程中最傷腦筋的一環,曾不止一次令我們頭痛。
在這次實習中,我們學到了測量的實際能力,更有面對困難的忍耐力,同時也認識到小組團結的重要性以及測量的步驟。首先,是熟悉了經緯儀用途及使用方法,掌握了儀器的檢驗和校正的方法,其次,在對數據的檢查和校正的過程中,明白了各種測量誤差的來源,其主要有三方面:儀器誤差、外界影響誤差、觀測誤差。了解如何避免測量結果誤差,最大限度的就是減少誤差的出現,即要做到:
1、提高自身的測量水平,降低誤差。
2、科學處理數據的數學方法如:多次測量取平均數等來減少誤差。
除此之外,還應掌握一套科學的測量方法,如:我們在控制點花費過多的時間,必須尋找科學的方法縮短測量時間,在有限的儀器情況下我們選擇距離交匯法(皮尺),角度交匯法(經緯儀),分兩組測量縮短時間。在測量中還要遵循一定的測量原則,如“從整體帶局部”、“先控制后碎步”的工作原則,并做到步步有檢核。這樣做不但可以防止誤差的積累,及時發現錯誤,更可以提高測量的效率。通過工程實踐,學會了地形圖的繪制和碎步的測量等課堂上無法做到的東西,很大程度上提高了動手和動腦的能力,同時也拓展了與同學的交際合作能力。一次測量實習要完整的做完,單靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的,如我們在碎步測量時分兩組測量使我們測量工作大幅提速,只有我們本小組各成員的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成。
這次實習,我們學到很多的東西。讓我更好的掌握了測量的基本功和測量的一些要素,同時也促進了與同學間的交往,使我懂得了團結互助的重要性以及儀器使用的正確方法
這次實習我想最大成功之處就是我們小組的團對合作精神。因為任何一項小的工作一個人都不能完成,必須有大伙的同力合作才能順利完成工作。應該說,沒有團隊就沒有我們今天的比較完美的實習結果。
經過兩周的測量實習以及測量后數據處理,本次實習順利結束。在這短短的兩周里,我們在測量過程中遇到了不少的困難,我們也克服了不少的困難,解決了一些困擾已久的問題。所以這兩周是緊張而又充實的兩周。
建筑工程專業的測量是一項實踐性比較強的工作。通過這次測量我在發現我是一個建筑工程專業的學生。測量也是一項務實求真的工作,來不得半點馬虎,我們在測量實習中必須保持數據的原始性,這也是很重要的一點。為了確保計算的正確性可有效性,我們得反復校對各個測點的數據是否正確。我們在測量中不可避免地犯下一些錯誤,比如讀數時估讀不夠準確,水準尺或花桿放得不垂直就讀數,讀數時間間隔過長,等等,都會引起一些誤差,因此,我們在測量中內業計算要和測量同時進行,這樣就可以及時發現錯誤,及時糾正錯誤,也避免了很多不必要的麻煩,節省時間,提高工作效率。由于這是一項歷史性工作,很多數據在以后都可能用到,我們就要力種樹各個數據的有效性,保留原始數據也利于以后的查證,這也體現了務實求真的精神,不僅在這次實驗中,在以后的工作和生活中,我們也應該做到這一點。
這次的實習也是一次培養我們獨立思考、工作能力的一次機會,在測量過程中,我們都要去想一想如何地去設點,怎樣去測量,要測哪一些數據,如何才能夠確保所測的數據有效性,然后一起討論解決。我們都沒有很豐富的經驗,也沒有測繪的天才,這就是要啟發我們個人的主觀能動性,發揮個人的聰明才智,自己給自己一次發揮的機會。
建筑測量頂崗實習報告二
自20xx年_月_日起,我們進行了為期14天的工程測量實習。
這次實習的內容是對工程測量知識的實踐化,實習的要求是讓每個同學都對工程測量的實際操作能夠達到基本掌握的程度。這次實習與以前的課堂實習相比,時間更加集中、內容更加廣泛、程序更加系統,完全從控制測量生產實際出發,加深對書本知識的進一步理解、掌握與綜合應用,是培養我們理論聯系實際、獨立工作能力、綜合分析問題和解決問題的能力、組織管理能力等方面素質。也是一次具體的、生動的、全面的技術實踐活動。
在實習的第一天,由_x老師給我們做了實習的動員。在動員會上,x老師強調了本次實習的重要性,并分析了水電校地理條件較復雜及建筑物密集等因素給本次實習帶來的困難。并鼓勵同學們努力克服困難,努力完成本次實習。還講解了儀器操作、搬遷中的注意事項,并要求在實習期間自行保管實習備品。本次實習中需要用到的儀器主要有水準儀、水準尺、腳架、經緯儀。當天我們就正式開始了室外的測量工作。
一、實習目的
1、鞏固課堂教學知識,加深對控制測量學的基本理論的理解,能夠用有關理論指導作業實踐,做到理論與實踐相統一,提高分析問題、解決問題的能力,從而對控制測量學的基本內容得到一次實際應用,使所學知識進一步鞏固、深化。
2、通過實習,熟悉并掌握三、四等控制測量的作業程序及施測方法。
3、掌握用測量平差理論處理控制測量成果的基本技能。
4、通過完成控制測量實際任務的鍛煉,提高獨立從事測繪工作的計劃、組織與管理能力,培養良好的咱也品質和職業道德。
5、熟悉水準儀、經緯儀、全站儀的工作原理。
二、實習心得
為期兩個星期的工程測量學習已經結束了,通過這次實習,讓我深刻明白了理論聯系實際的重要性。測區是我們重慶市永川區水利電力職業技術學院校區,雖然測區比較大,基本上是整個學校,測繪圖也是我們整個學校的平面圖,為了能盡快地完成任務,我們小組星期六、星期天加班進行測量,我們在測量的過程中也并不感到累,也沒有感到辛苦,反而還能自得其樂。
測量學首先是一項精確的工作,通過在學校期間在課堂上對測量學的學習,使我在腦海中形成了一個基本的、理論的測量學輪廓,而實習的目的,就是要將這些理論與實際工程聯系起來。測量學是研究地球的形狀和大小以及地面點位的科學,從本質上講,測量學主要完成的任務就是確定地面目標在三維空間的位置以及隨時間的變化。在信息社會里,測量學的作用日益重要,測量成果做為地球信息系統的基礎,提供了最基本的空間位置信息。構建信息高速公路、基礎地理信息系統及各種專題的和專業的地理信息系統,均迫切要求建立具有統一標準,可共享的測量數據庫和測量成果信息系統。因此測量成為獲取和更新基礎地理信息最可靠,最準確的手段。測量學的分類有很多種,如普通測量學、大地測量學、攝影測量學、工程測量學。作為建筑工程系的學生,我們要學習測量的各個方面。測繪學基礎就是這些專業知識的基礎。
通過這次實習,學到了測量的實際能力,更有面對困難的忍耐力;也學到了小組之間的團結、默契,更鍛煉了自己很多測繪的能力。首先,是熟悉了水準儀、經緯儀的用途,熟練了水準儀、經緯儀的各種使用方法,掌握了儀器的檢驗和校正方法。其次,在對數據的檢查和矯正的過程中,明白了各種測量誤差的來源,其主要有三個方面:儀器誤差(儀器本身所決定,屬客觀誤差來源)、觀測誤差(由于人員的技術水平而造成,屬于主觀誤差來源)、外界影響誤差(受到如溫度、大氣折射等外界因素的影響而這些因素又時時處于變動中而難以控制,屬于可變動誤差來源)。了解了如何避免測量結果錯誤,最大限度的減少測量誤差的方法,即要作到:
(1)在儀器選擇上要選擇精度較高的合適儀器。
(2)提高自身的測量水平,降低誤差水平。
(3)通過各種處理數據的數學方法如:距離測量中的溫度改正、尺長改正,多次測量取平均值等來減少誤差。
第三,除了熟悉了儀器的使用和明白了誤差的來源和減少措施,還應掌握一套科學的測量方法,在測量中要遵循一定的測量原則,如:“從整體到局部”、“先控制后碎部”、“由高級到低級”的工作原則,并做到“步步有檢核”。這樣做不但可以防止誤差的積累,及時發現錯誤,更可以提高測量的效率。通過實踐,真正學到了很多實實在在的東西,比如對測量儀器的操作、整平更加熟練,學會了數字化地形圖的繪制和碎部的測量等課堂上無法做到的東西,很大程度上提高了動手和動腦的能力。
我們在這次的實習中,也了解到了要想很好地進行測量,首先必須要掌握過硬的基本理論知識,要有實干精神,每個組員都必須親自實踐,而且要分工明確,工作也可以交換來做,還需要知道失敗乃成功之母,在實習測量的過程中,不可能完全的沒有錯誤,我們應該不氣餒,繼續一次又一次的重測,重計算,一次次地練習,一次次得提高測量水平,我們不斷在經驗中獲得教訓。而且也多虧了老師的指導,我們實習之初,遇到了各種各樣的困難,多虧的老師的耐心講解,才使我們解決了不少測量中的難題。
我們在實習過程中,不可避免的遇到了一些困難,在我們實現之初,我還有點擔心自己不會測,測不好,擔心只有兩個星期的測量時間,自己不能按時的完成任務,但是,經過我們小組的反復測量,我們的團結、默契,克服了測量中的種種問題,終于按時完成了任務。在測量實習的過程中,我們也遇到了各種各樣的困難。比如:
(1)立標尺時,標尺除立直外,還要選在重要的地方。因此,選點就非常重要,點一定要選在有代表性的地方,同時要注意并非點越多越好,相反選取的無用點過多不但會增加測量,計算和繪圖的勞動量和多費時間,而且會因點多而雜亂產生較大的誤差。
(2)在用水準儀和經緯儀測量的過程當中,有的過程出現了大的誤差,經過我們的重新測量計算,誤差范圍也減小到了可以允許的范圍里。
(3)還有就是計算問題,計算必須由兩個人完成,一個初步的計算,一個檢驗,不過,在此過程當中,也還是出現了計算錯誤的問題,我們在不斷的重復檢驗之中算出了正確的數值,盡量讓誤差減少到了最少
通過實際的測量實習,讓我學到了很多實實在在的東西,比如對儀器的操作更加熟練,學會了地形圖的繪制和碎部的測量等課堂上無法做到的東西,很大程度上提高了動手和動腦的能力,同時也拓展了與同學的交際、合作的能力。一次測量實習要完整的做完,單單靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的,只有小組的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成。
建筑測量頂崗實習報告三
一、前言
這次實習的內容是對工程測量知識的實踐,實習的要求是讓每個同學都對工程測量的實際操作能夠達到基本掌握的程度。這次實習與以前的課堂實習相比,時間更加集中、內容更加廣泛、程序更加系統,完全從控制測量生產實際出發,加深對書本知識的進一步理解、掌握與綜合應用,是培養我們理論聯系實際、獨立工作能力、綜合分析問題和解決問題的能力、組織管理能力等方面素質。也是一次具體的、生動的、全面的技術實踐活動。
二、實習目的
鞏固課堂教學知識,加深對控制測量學的基本理論的理解,能夠用有關理論指導作業實踐,做到理論與實踐相統一,提高分析問題、解決問題的能力,從而對控制測量學的基本內容得到一次實際應用,使所學知識進一步鞏固、深化。同時,熟悉水準儀、經緯儀、全站儀的工作原理。
三、實習心得
為期兩個星期的工程測量學習已經結束了,通過這次實習,讓我深刻明白了理論聯系實際的重要性。測區是我們_學校,雖然測區比較大,基本上是整個學校,測繪圖也是我們整個學校的平面圖,為了能盡快地完成任務,我們小組星期六、星期天加班進行測量,我們在測量的過程中也并不感到累,也沒有感到辛苦,反而還能自得其樂,同時也讓我感嘆良多。
第一點:學會妥協。
妥協是最高的藝術,在合作的過程中,不免會有一些沖突,這時就需要我們冷靜下來想想問題的解決方法,每個人都做一些退讓,那么事情就容易解決了。
第二點:團隊精神,同甘共苦。
這是一個老生常談的詞,但在這種實踐中不得不提及,因為它無處不在,記得很清楚的是很多次我們在測量場地上吃午飯的;是我們都很早起床,然后在冷風颼颼中作業,每個人都在打顫;是我們都扛著儀器摸著黑回家。這一切的苦與樂,我們都一起承擔。同甘共苦,我們很快樂!
第三點:感染力很重要。
在一個團隊中,要想有好的氛圍,第一個提意見的人的思想是很重要的,因為后來的人都不免會有從眾心理。如果他(她)的想法是積極的,那么會有人也會積極的想一些問題。反之,則整個團隊就陷入消極的氛圍中。所以,我們每個人都應該積極的想問題。
第四點:多多思考。
實習是什么,實習是將理論知識內化為自己知識的過程。實習過程中只有多多思考,才能多多消化知識,還能延伸出很多以前不知道的。
做最“卑微”的工作,樹高傲的自尊。一個好的團隊,需要每個人都勤奮一點,不怕臟、不怕累,而不是推三落四。只有每個人都積極的做每件事,才能達到實習的目的,使每個人都熟悉每一個環節。
長大了,要試著去承擔一些責任。我們生來就有一種惰性,無論是個人,還是一個團隊,如果是在一個惰性的氛圍中,那她(們)的效率一定不會很高,但如果每個人都有強烈的責任感,能夠努力去承擔一些責任,那么效率不僅提高了,而且任務也會完成的很好。
【Abstract】Objective:Comprehensive to analyze the sources and influencing factors of content uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC.Methods:According to the testing process,a mathematical model was established to analyze the sources and influencing factors in uncertainty,through the quantitative analysis of uncertainty,obtained the expanded uncertainty.Result:The expanded uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC was 1.843%.Conclusion:The main sources of uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC was regulating the concentration of standard solution,preparation of standard solution and the repeatability of method.
【Keywords】HPLC;Vitamin A;Mathematical model;Uncertainty
引言
維生素A能夠調節人體的多種生理機能,增強機體免疫能力,在調節體內各方面的代謝及促進骨骼的生長發育上有著極其重要的作用,同時它也參與視網膜視紫質的合成與再生,維持正常的視覺反應,以降低夜盲癥和視力減退的發生[1,2]。而維生素A攝入過量也會引起副作用,可損害腦組織等,因此維生素A制劑含量的控制十分重要[3]。本文根據JJF 1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》[4],并參考JJG 196-2006《常用玻璃量器檢定規程》[5],結合檢測方法和數學模型,對高效液相色譜法測定保健食品中維生素A的含量進行不確定度評估,找出不確定度主要來源,為方法的優化和評定測量結果提供依據。
研究部分
1.提要
1.1測量方法:GB/T 5009.82-2003。
1.2基本原理:試樣經過高溫皂化、提取處理后,用乙醚萃取,蒸干乙醚后用乙醇定量溶解。利用高效液相色譜儀對樣品中的維生素A進行分離和測定。
2.材料與方法
2.1材料
2.1.1儀器設備:
Agilent-1260高效液相色譜儀; KQ-500VED型超聲儀;
EMS-50型恒溫水浴鍋; UV-2450紫外分光光度計;
R-202旋轉蒸發儀; XP-205分析天平;
MS-304S分析天平。
2.1.2試藥:
乙醇(AR);抗壞血酸(AR);氫氧化鉀(AR);乙醚(AR);無水硫酸鈉(AR);甲醇(色譜純)。
芘(廠家:DR,批號:01116,純度:99.0%);維生素A(廠家:SIGMA,批號:BCBG2044V,純度:98.0%)。
2.2色譜條件:
色譜柱:CNW Athena C18-WP(5μm,150mm×4.6mm);流動相:甲醇:水=(94:6);
流速:1.0mL/min;柱溫:40℃;檢測波長:300nm。
2.3分析步驟:
2.3.1內標溶液的配制
精密稱取芘內標物49.28mg至1000ml容量瓶中,用乙醇溶解并定容至刻度,搖勻,作為內標溶液。
2.3.2標準儲備母液的配制
精密稱取維生素A對照品12.35mg至100ml容量瓶,用乙醇溶解并定容至刻度,搖勻,作為標準儲備母液。
2.3.3標準溶液的配制
精密量取標準儲備母液0.5mL,1.0mL,2.0mL,3.0mL,5.0mL,置于25mL棕色容量瓶中,精密加入內標溶液3mL,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得5個不同濃度的標準溶液。
2.3.4標準溶液的濃度校正
精密量取1mL標準儲備母液至50mL容量瓶中,加入適量乙醇搖勻并定容至刻度,以乙醇為空白,在325nm波長處測定,其平均吸光度為0.4376。維生素A的吸光系數為1835。
2.3.5樣品處理
2.3.5.1皂化
本實驗樣品為維生素A維生素D軟膠囊(兒童型)。取20粒樣品,擠出內容物,攪拌均勻。精密稱取試樣0.1g,置于250mL錐形瓶中,用約50mL乙醇使其溶解,直到顆粒物分散均勻為止。加入25mL 10%抗壞血酸水溶液、3mL內標溶液、10mL氫氧化鉀水溶液(1:1),混勻。于沸水浴回流60min,使皂化完全。取出立刻冷卻至室溫。
2.3.5.2 提取及濃縮
用50mL的水分兩次將皂化液全部轉入500 mL分液漏斗中,加入100mL乙醚,輕輕搖動,排氣后蓋好瓶塞,室溫下振蕩約10min后靜置分層,將水相轉入另一500mL分液漏斗中,按上述方法進行第二次萃取。合并醚液,用水洗至近中性。醚液通過無水硫酸鈉過濾脫水,濾液收入500mL圓底燒瓶中,于旋轉蒸發儀上在50℃±2℃充氮條件下蒸至近干(絕不允許蒸干)。殘渣加入適量乙醇,超聲波提取溶解,將乙醇轉移到25mL容量瓶中,用乙醇洗滌圓底燒瓶數次,洗滌液全部轉移到同一25mL容量瓶中,用乙醇定容至刻度,搖勻,過濾,即得供試品溶液。
2.3.5.3測定
待儀器穩定后,分別吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL,注入液相色譜儀,測定。
3.數學模型
式中: X―樣品中維生素A的含量,mg/100g;
M―樣品的質量,g;
V―樣品的稀釋體積,mL;
C―樣品溶液中維生素A的濃度,μg/mL。
由實驗過程和數學模型可以看出,影響維生素A測定結果的不確定度因素有:除了樣品的質量,樣品的稀釋體積, 樣品溶液中維生素A的濃度之外,還有高效液相色譜儀進樣的重復性,樣品處理過程的一致性和高效液相色譜儀積分面積重復性等因素對測定結果產生影響。故不確定度的來源可以歸納為以下幾個方面:
3.1重復測定導致的不確定度ur(1):包括樣品處理過程的一致性所產生的不確定度;
3.2高效液相色譜儀所產生的不確定度ur(2):包括進樣的重復性、液相色譜儀積分面積重復性所產生的不確定度;
3.3樣品稱量所產生的不確定度ur(3);
3.4樣品定容體積所引入的不確定度ur(4):包括容量瓶體積所產生的不確定度;溫度變化所產生的不確定度;內標溶液加入體積的不確定度;
3.5標準溶液配制所引入的不確定度ur(5):包括標準溶液配制過程中容量瓶體積產生的不確定度;稀釋5個不同濃度標準溶液過程中刻度吸管所產生的不確定度;內標溶液加入體積所產生的不確定度;溫度變化所產生的不確定度;
3.6標準溶液濃度校正所產生的不確定度ur(6):包括紫外分光光度計產生的不確定度;溫度變化產生的不確定度;校正標準溶液濃度時所使用的移液管、容量瓶所產生的不確定度;
3.7由于標準溶液的濃度由吸光度來校正,且內標溶液的濃度對測量結果不產生影響,故維生素A對照品的稱樣量及純度,芘內標物的稱樣量及純度,均不參與評定。
4.各分量不確定度評定
4.1重復測定導致的不確定度ur(1)
4.1.1樣品處理過程的一致性,采用平行測定10次的結果進行評定,屬于A類評定,按照實驗方法對樣品平行測定。結果如下:
維生素A含量測定的標準偏差為:
1.231
標準不確定度: u(4.1.1)===0.3893
相對標準不確定度為: ==0.4768%
4.2高效液相色譜儀所產生的不確定度ur(2)
4.2.1進樣的重復性,液相色譜儀積分面積重復性,采用同一個樣品重復進樣10次, 以維生素A和芘的峰面積的比值來進行評定(n=10)。屬于A類評定。結果如下:
維生素A和芘的峰面積比值的標準偏差為:0.007773
標準不確定度: u(4.2.1)= ==0.002459
相對標準不確定度為:ur(2) ===0.2014%
4.3樣品稱量所產生的不確定度ur(3)
4.3.1使用XP-205分析天平進行稱量,天平的校準證書給出的測量結果示值誤差的擴展不確定度U=0.06mg,k=2,屬正態分布,樣品的稱樣量m=105.77mg,則有:
標準不確定度為:
相對標準不確定度為:ur(3)=
4.4樣品定容體積引入的不確定度ur(4)
4.4.1樣品定容過程只用到25mL的容量瓶,由25mL容量瓶的校準證書可知,這些容量瓶都屬于A級,測量結果的擴展不確定度U=0.01mL,k=2,屬于正態分布,則有:
標準不確定度為:u(4.4.1)===0.005mL
相對標準不確定度為:ur(4.4.1)==0.02000%
4.4.2由于本實驗室溫度在20±5℃的范圍內波動,假設溫度變化為5℃,該溫度引起的不確定度可通過估算溫度范圍和體積膨脹系數計算,液體的體積膨脹明顯大于容量瓶的體積膨脹,故只考慮前者即可。設溫度為矩形分布,換算系數為,水的膨脹系數為/℃,則有:相對標準不確定度為:ur(4.4.2)=5××100%=0.06063%
4.4.3樣品溶液中內標溶液的加入只用到3mL的單標線吸量管,由校準證書可知,實驗中所用的3mL單標線吸量管,屬于A級,測量結果的擴展不確定度U=0.002mL, k=2,屬于正態分布,則有:標準不確定度為:u(4.4.3)== =0.001mL
相對標準不確定度為:ur(4.4.3)==0.03334%
則,樣品定容體積所引入的不確定度ur(4),為ur(4.4.1)、ur(4.4.2)和ur(4.4.3)的合成,即:
4.5標準溶液配制所引入的不確定度ur(5)
4.5.1標準溶液配制過程中,需要用到5個25mL的容量瓶。參照4.4.1中相對標準不確定度的計算方法,則有:標準不確定度為:u(4.5.1)===0.005mL
相對標準不確定度為:ur(4.5.1)=5=0.1000 %
4.5.2 移取標準溶液所用的5mL刻度吸管,從校準證書可知,該刻度吸管屬于A級,吸量結果的示值誤差為:0~1mL為0.010mL,1~5mL 皆為0.014mL,按三角分布轉化成標準不確定度。配制過程中,分別移取了0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL。則5mL刻度吸量管所產生的不確定度為5次移取標準溶液的標準不確定度的合成,即:
ur(4.5.2)=
4.5.3對照品溶液中內標溶液的加入所產生的相對標準不確定度,可參照4.4.3,則有:
標準不確定度為:u(4.5.3)===0.001mL
相對標準不確定度為:ur(4.5.3)=5=0.1667%
4.5.4溫度變化帶來的體積不確定度,同4.4.2,則有:ur(4.5.4)=0.06063%。
標準溶液配制所引入的不確定度ur(5),為ur(4.5.1)、ur(4.5.2)、ur(4.5.3)和ur(4.5.4)的合成,即:
4.6標準溶液濃度校正時所引入的不確定度ur(6):
4.6.1用紫外分光光度計對標準溶液濃度進行校正,測得吸光度A=0.4376;紫外分光光度計的校準證書給出的測量結果示值誤差的擴展不確定度U=0.005,k=2,屬正態分布,則有: 標準不確定度為: u(4.6.1)==
相對標準不確定度為:ur(4.6.1)=
4.6.2溫度變化帶來的體積不確定度,同4.4.2,則有:ur(4.6.2)=0.06063%
4.6.3校正標準溶液濃度時所產生的不確定度分別為:
4.6.3.1 1mL單標移液管:由校準證書可知,實驗中所用的1mL單標移液管,屬于A級,測量結果的擴展不確定度U=0.002mL, k=2,屬于正態分布,則有:
標準不確定度為:u(4.6.3.1)===0.001mL
相對標準不確定度為:ur(4.6.3.1)==0.1000%
4.6.3.2 50mL容量瓶:由50mL單標線容量瓶的校準證書可知,實驗中所用的50mL單標線容量瓶,屬于A級,測量結果的擴展不確定度U=0.02mL, k=2,屬于正態分布,則有: 標準不確定度為:u(4.6.3.2)===0.01mL
相對標準不確定度為:ur(4.6.3.2)==0.02000 %
所以該項的不確定度ur(4.6.3),為ur(4.6.3.1)和 ur(4.6.3.2)的合成,即:
則標準溶液濃度校正所引入的不確定度ur(6),為ur(4.6.1)、ur(4.6.2)和ur(4.6.3)的合成,即:
4.7合成標準不確定度評定,將上述不確定度分量列表如下:
合成標準不確定度:
5.擴展不確定度評定
擴展不確定度可由合成標準不確定度乘以包含因子,取置信概率p=95%,則k=2,因此樣品中的維生素A含量測定的擴展不確定度為:
U=k×ur(x)=2×0.9214%=1.843%
6.測量不確定度的結果與表示
不確定度結果:U(X)= 81.66 ×1.843%= 1.51 mg/100g
樣品中維生素A的含量:W= 81.66±1.51 mg/100g
7.討論
從表3可以看出,維生素A含量測定的不確定度因素中,影響最大的是標準溶液濃度校正、標準溶液配制和方法總重復性,影響最小的是高效液相色譜儀、樣品定容體積和樣品稱量等產生的不確定度。因此提示在今后的含量檢測過程中,要注意標準溶液濃度校正,要選用高校準級別的容量瓶和單標移液管,還要對紫外分光光度計進行定期的檢定與維護保養。而且要求分析人員熟練掌握樣品的各項處理步驟,以提高檢測準確性。
參考文獻:
[1]黃敏,黃增瓊.高效液相色譜法測定復合魚肝油制劑中維生素A的含量[J].廣西醫科大學學報,2007,24(3):600-601.
[2]錢玲慧,廖佳宇,李亞妮,莫曉帆,馬麗,姚彤煒.測定維生素A的三種方法比較[J].實驗技術與管理,2012,29(5):43-48.
[3]李東文.HPLC檢測復合魚肝油制劑中維生素A含量的可行性[J].河北醫藥,2013,35(12):1986-1987.
[4]國家質量監督檢驗檢疫總局.JJF1059.1-2012測量不確定度評定與表示[M].中國質檢出版社,2012:1-53.
[5]國家質量監督檢驗檢疫總局.JJG196-2006常用玻璃量器檢定規程[M].中國計量出版社,2006:1-22.
[6]蘇佳妍,岳青陽,于大海.維生素A含量測定方法的研究[J].山西醫藥雜志,2010,39(6):557-558.
為準確掌握工作面支架受力情況及頂板來壓情況,在工作面均勻布置了20個礦壓觀測點,重點觀測工作面支架阻力隨工作面推進變化,得出工作面周期來壓步距,由頂板壓力動態曲線圖分析頂板來壓強度,本次報告分析從2月26日至3月25日,本月共推進171米。
2、礦山壓力分析報告
本報告在工作面5#、10#、15#、20#、25#、30#、35#、40#、45#、50#、55#、60#、65#、70#、75#、80#、85#、90#、95#、100#支撐狀態較好及礦壓顯現規律較強的20架對3月份頂板動態壓力進行分析。由圖可知,2月27日-3月1日、3月10日-3月13日、3月17日-3月20日工作面支架壓力顯示波動頻繁,幅度也較大,壓力表最大為44MPa。表明工作面平均每兩天頂板周期來壓一次,由此確定90101工作面周期來壓步距為15米。
3、工作面壓力分析及來壓后采取的措施
來壓期間,工作面煤質較軟,壓力較大,作業時必須注意頂板支護和煤幫的管理。當工作面出現周期來壓時,割煤后,及時移架支護,嚴格執行“敲幫問頂”制度,不得空頂作業,工作面上下端頭出口高度不得低于1.8米,出口必須保持清潔、暢通。如出現斷梁折柱、底板鼓起、片幫等現象時,必須進行處理。當上、下隅角處采空區壓力過大時,必須采用戧柱或架設π型梁加強支護。嚴格按照《90101綜采面回采作業規程》規定作業。
4、科室建議
(1)每周二生產科專職人員對周期來壓時間進行確認,及時反饋至綜采隊,綜采隊根據周期來壓時間加強支護,及時移架,保證工作面工程質量,防止架前冒頂。
(2)要求生產科與綜采隊在做好日常監測的同時,每周五安全檢查時,抽調生產科與綜采隊維修專職人員,組成頂板聯合監測組對90101運輸、回風順槽頂板重點進行監測,發現隱患及時上報并現場安排維修組進行處理,確保頂板安全。
股骨干骨折合并同側股骨頸基底部骨折治療的難度較大,以往多采用切開復位、分段固定的方法,創傷大、出血多,且固定不可靠。我院自2000年4月份至2006年12月份,采用股骨重建釘治療股骨干合并同側股骨頸基底部骨折7例取得較好療效。
1 資料與方法
1.1 一般資料 本組7例,其中男5例、女2例。年齡:27~45歲,平均36歲,均為交通傷,閉合性骨折,股骨干骨折中上段5例、中下段2例,均為粉碎性骨折。股骨頸基底部骨折Garden分型Ⅲ型5例,Ⅳ型2例,合并上肢骨折2例,血氣胸2例,腦挫裂傷2例,下頜骨折1例,脾破裂1例,受傷至手術時間為3~11天,平均7天。
1.2 手術方法 患者入院后均行骨牽引,復合傷請有關科室處置,完善相關檢查,攝患側、健側股骨全長X光片,待病情平穩后手術治療。連硬麻醉,病人取平臥位,傷髖下軟枕墊高約20~30cm,消毒鋪巾,內收患肢,于大轉子上方作長約6cm切口,逐層分離,辨認梨狀窩于該處緊貼大轉子內側皮質,保持與股骨干軸線平行擴口,φ8mm髓腔銼開擴髓依次加大至比術前X光片測量選定直徑大1mm,用選定型號重建釘推入股骨髓腔近端,將股骨骨折閉合復位(如有困難采用小切口持骨器把持復位),保持力線正常,擊入重建釘,并根據近端瞄準器水平保持前傾角10~15度。先安放近端鎖釘,再將股骨頸骨折閉合復位,鎖定股骨頸鎖釘。
1.3 術后處理 術后持續皮牽引,第三天可坐起,并進行股四頭肌功能鍛煉,2~3個月后扶拐離床,根據X線片示骨痂生長情況,決定部分負重及完全負重時間。
2 結果
7例患者術后獲16~28個月,平均22個月隨訪,完全負重時間為18~24個月,平均21個月,5例患者于術后20周改為動力固定,骨折全部愈合,愈合時間為6~18個月,平均11個月。1例患者因術中操作不當,股骨鎖釘距股骨頸上方皮質過近,術后固定不可靠,導致術后20天股骨頸鎖釘切割入關節,內固定失敗,重新手術后獲愈合。所有患者無髖內翻及成角畸形,無主釘折彎及斷裂,根據sanders功能評分標準,評定療效優4例、良2例、差1例。
3 討論
股骨干骨折合并同側股骨頸基底部骨折是一種罕見的高能量損傷,以往的內固定材料無法同時堅強固定兩處骨折,治療上往往顧此失彼,且傳統切開復位創傷大失血多,骨折愈合時間長,并發癥多,髓內釘固定為中軸性固定,屬于應力分享式固定,應力遮擋小,后期改為動力固定,更是最大限度地減少應力遮擋,有利于骨痂的塑形,且可以同時達到兩個骨折部位的堅強固定。
3.1 診斷 對于嚴重高能量損傷導致的股骨干骨折,伴有同側髖關節腫脹疼痛,應常規攝髖關節正位片,以免股骨頸骨折漏診。
3.2 骨折的復位 閉合復位具有切口小,失血少,感染率低,及有利于骨折愈合等優點,為首選復位方法,但不可強求,為保護手術人員身體健康,降低放射性損傷,減少手術時間,閉合穿釘時間大于30分,可采用小切口開放復位。關于復位的順序,因為股骨的完整性、連續性遭到破壞,牽引下無法完成股骨頸骨折復位所需的旋轉動作和必要的牽引力,所以我們先將股骨干骨折復位以恢復其完整性、連續性。先安放下端鎖釘,防止其再移位,然后整復股骨頸骨折,安放近端鎖釘。
3.3 靜力固定與動力化 靜力固定不允許髓內釘在骨干內滑動,控制了軸向短縮與旋轉,但增加了應力遮擋,早期負重可導致鎖釘折斷。動力化后可增加骨折處的軸向負重,從而增加骨折愈合機會。本組患者由于為粉碎性骨折,早期全部采用靜力固定,5個月復查X光片,示骨痂生長良好后改為動力性固定。但需注意過早的動力化可能導致肢體短縮。
3.4 并發癥分析 本組1例病人術后20天出現上段鎖釘切割入關節,導致內固定失敗,主要是術中操作時,髓內釘擊入稍淺導致股骨頸鎖釘位置靠上,最上方一枚鎖釘擰入時即部分穿過股骨頸皮質,術后外固定不可靠,斷端間反復微動最后導致鎖釘穿出。所以打入髓內釘時,應根據鎖孔的位置和鎖釘的進釘角度不斷調整主釘進釘深度,以確保兩枚鎖釘完全穿入股骨頸骨質內。
C-反應蛋白(CRP)是機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時肝細胞合成的一種急性時相蛋白,在炎癥開始數小時CRP就升高,48小時可達峰值,隨著病變消退、組織、結構和功能的恢復降至正常水平[2-3]。隨著hs-CRP使用的推廣, 越來越多的臨床實驗室開始開展該項目的檢測。現對我科新購入的用于檢測該項目的 Nephstar PLUS特定蛋白分析儀作一個在hCRP檢測方面的性能分析。
1.材料與方法
1.1儀器與試劑 深圳國賽Nephstar PLUS特定蛋白分析儀及其配套試劑。
1.2試驗樣本:隨機抽取當日門診病人EDTA-K2抗凝血數支;深圳國賽超敏C-反應蛋白高值標準品,產品批號:1130-J05,靶值:147mg/L;深圳國賽超敏C-反應蛋白質控品,批號:0212032851 范圍:16.333~24.500 mg/L。
1.3方法
1.3.1精密度試驗 取三份新鮮全血,要求其hs-CRP值分別在1.00~10.00 mg/L,10.00~100.00 mg/L,100.00~200.00 mg/L這三個范圍內。嚴格按照儀器說明的操作規程在Nephstar PLUS特定蛋白分析儀上各檢測20次,總檢測時間控制在1小時之內,計算其均值,SD值和CV值。
1.3.2準確度評估 取深圳國賽超敏C-反應蛋白高值標準品和深圳國賽超敏C-反應蛋白質控品各一支,嚴格按照試劑說明書對標準品和質控品進行前處理,在Nephstar PLUS特定蛋白分析儀上對此兩支標本分別進行檢測,比較質控品檢測值是否落在其要求范圍內,以標準品的定值為靶值,計算檢測系統的偏倚。
1.3.3 線性范圍驗證 儀器說明書給出的線性范圍為1.0~350mg/L,現用以下方法對此參考范圍進行驗證。取一份靶值為296mg/L的標準品,按7(標準品):3(樣本稀釋液) 的比例將其稀釋成207.2mg/L的濃度作為基準液。該基準液在全血模式下的理論檢測結果為:207.2*5/3=345.3mg/L。將基準液按1:1、1:3、1:9、1:99和1:399的比例進行稀釋,配制成50%、25%、10%、1%和0.25%的稀釋度。每個稀釋度在全血模式下重復測定2次,計算均值。將實測值與理論值作比較,計算 y=ax+b,和相關系數R2,驗證其線性范圍。
1.4 統計學分析 運用Microsoft Excel V11軟件和SPSS10.00統計分析軟件處理。
2.結果
2.1 精密度試驗結果 三份不同hCRP濃度的全血標本的重復性試驗結果見表1。此結果表明:高、中、低三個濃度的hCRP檢測的批內CV%均小于5%,即精密度良好。
表1 批內精密度(n=20)
標本 平均值X(mg/L) 標準差SD(mg/L) 變異系數CV(%)
高值 129 3.199 2.48
中值 54.32 1.994 3.67
低值 2.68 0.113 4.21
2.2 準確度評估 質控品檢測結果為19.546mg/L,落在其要求范圍(16.333~24.500 mg/L)內。標準品(靶值147mg/L)檢測結果為152.377 mg/L,偏差為3.7%,在可接受范圍內,即準確度良好。
2.3 線性范圍驗證結果 見表2和圖1。結果經統計分析得出理論值和實測值之間的線性方程為y =0.9707x+0.4804,兩者間的相關系數R2為0.9992,即理論值與實測值之間相關性良好,線性范圍驗證通過。
表2 線性稀釋結果
理論濃度(mg/L) 實際濃度(mg/L)
1 2 X
172.65 177.376 181.302 173.45
86.325 88.436 90.023 86.849
34.53 35.077 36.158 33.996
3.453 3.062 3.213 2.911
0.863 0.394 0.398 0.39
3.討論
hs-CRP已被證實是由慢性炎癥引發心血管疾病的獨立危險因素,超敏CRP的檢測工作也已在各醫院臨床實驗室內得到廣泛的開展。但由于對此項目的檢測國家并沒有出臺相應的標準,也沒有相關的室間質評作為項目檢測方法是否合格的評估,因此,實驗室內對超敏CRP檢測系統的驗證就尤為重要。
本文的研究分析得到,Nephstar PLUS特定蛋白分析儀檢測高、中、低三個濃度的hCRP檢測的批內CV%均小于5%,即精密度良好。而在準確度的評估上,質控品檢測結果為19.546mg/L,落在其要求范圍(16.333~24.500 mg/L)內。標準品(靶值147mg/L)檢測結果為152.377 mg/L,偏差為3.7%,在可接受范圍內,說明準確度良好,符合臨床上使用要求。在線性范圍驗證的實驗上,以207.2mg/L的濃度作為基準液,將其稀釋成5個不同濃度,計算理論值分別為172.65 mg/L、86.325 mg/L、34.53 mg/L、3.453 mg/L、0.863 mg/L,用Nephstar PLUS特定蛋白分析儀檢測hCRP的實際濃度兩次,計算平均值,根據數據得出線性方程為y =0.9707x+0.4804,兩者間的相關系數R2為0.9992。說明理論值與實際值的相關性強。
以上實驗表明,深圳國賽Nephstar PLUS特定蛋白分析儀在超敏CRP檢測方面,精密度和準確度均良好,廠家儀器說明書提供的線性范圍也驗證合格,能達到臨床實驗室工作的要求,可正常使用。
參考文獻
熒光增白劑(Fluorescent whitening agents,FWA)是一種熒光染料,常被用于紙、塑料等行業的生產中,以提高產品的白度和艷度。鑒于熒光增白劑可能通過食品包裝遷移到食品,被人體吸收后會對人體造成危害,各國對熒光增白劑進行了監管,制定了允許用于生產食品接觸材料的熒光增白劑清單,如歐盟2002/72/EC[1]列出了FWA 393, FWA 184, FWA 236和FWA 368等塑料用熒光增白劑,并明確規定食品包裝紙最終產品的熒光增白劑的限制為“檢測不到該物質遷移到食品中的量”[2];我國列出了FWA 393, FWA 184和FWA 236 3種塑料用熒光增白劑[3], 同時規定紙包裝產品“生產過程中不得使用熒光增白劑”[4]。因此,建立食品接觸紙包裝材料中熒光增白劑的快速定性與定量檢測方法,有利于對可能存在的違禁添加熒光增白劑行為進行監管。
目前,常用的熒光增白劑的檢測方法有紫外燈照射觀測法(ULO)[5]、薄層層析法(TLC)[6]、液相色譜法(HPLC)[6,7]和液相色譜串聯三重四級桿質譜法(LCMS/MS)[7,8]等。ULO、TLC和HPLC的方法靈敏度和選擇性較差;LCMS/MS采用MRM模式檢測,靈敏度高,抗干擾能力強,但仍受分辨率、掃描速率和模式的限制,不能滿足快速篩查的需求。高效液相色譜串聯高分辨飛行時間質譜(LCTRIPLETOF)不僅具備了高分辨飛行時間質譜能測得化合物及其碎片離子的分子式和精確分子量數據的特性[9~11],同時具備完全定性、同時定性定量、完全定量3種(Triple)工作流程,在LCTRIPLETOF的TOF MS觸發TOF MS/MS的模式下檢測,可以根據保留時間、一級離子質量準確度、一級離子同位素分布、二級碎片與譜庫匹配4種手段準確定性,具有高分辨率、高靈敏度和高掃描速度等特點[12]。目前尚未見應用LCTRIPLETOF分析熒光增白劑的報道。
本研究采用液相色譜串聯高分辨飛行時間質譜技術,以食品接觸紙包裝材料中FWA368, FWA367, FWA185, FWA184, FWA52, FWA135和FWA393(結構圖見表1)7種熒光增白劑為研究對象,建立了7種熒光增白劑的MS/MS數據庫,并通過優化前處理方法和色譜質譜條件,建立了食品接觸紙質包裝材料中熒光增白劑的定性確證及定量檢測方法。 2 實驗部分
2.1 儀器與試劑
1 Commission Directive 2002/72/EC
2 Santos M, Batlle R, Salafranca J, Nerín C. J. Chromatogr. A, 2005, 1064: 135-141
3 GB 96852008, Hygienic Standards for Uses of Additives in Food Containers and Packaging Materials. National Standards of the People′s Republic China
食品容器、包裝材料用添加劑使用衛生標準. 中華人民共和國國家標準. GB 96852008
4 The Detailed Rules for the Implementation of the Production License of Food Contact Paper Package, Containers and Other Products. Beijing: General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine of the People′s Republic of China, 2007
食品用紙包裝、容器等制品生產許可實施細則. 北京:國家質量監督檢驗檢疫總局, 2007
5 Escabasse J Y. Ottenio D. Food Additives and Contaminants, 2002, 19: 79-92
6 XIAN YanPing, GUO XinDong, LUO HaiYing, WU YuLuan, CHEN YiGuang, LUO DongHui, WU WenHai. Chinese Journal of Chromatography, 2013, 31(2): 162-169
冼燕萍, 郭新東, 羅海英, 吳玉鑾, 陳意光, 羅東輝, 吳文海. 色譜, 2013, 31(2): 162-169
7 Chen H C, Wang S P, Ding W H. J. Chromatogr. A., 2006, 1102(12): 135-142
8 Guo X D, Xian Y P, Luo H Y, Wu Y L, Luo D H, Chen Y G, Lu Y J, Xu D. Anal. Methods, 2013, 5: 6086-6093
9 Deng X J, Yang H Q, Li J Z, Song Y, Guo D H, Luo Y, Du X N, Bo T. J. Liquid Chromatogr. Related Technol., 2011, 34: 2286-2303
10 ZHANG Feng, XU ChengBao, LAN Fang, WANG XiuJuan, YONG Wei, SUO Ran, CHU XiaoGang, DING Fei, L QuanFu. Chinese J. Anal. Chem., 2012, 40(1): 101-106
張 峰, 許成保, 藍 芳, 王秀娟, 雍 煒, 鎖 然, 儲曉剛, 丁 菲, 呂泉福. 分析化學, 2012, 40(1): 101-106
11 YAN LiJuan, ZHANG Jie, PAN ChenSong, LIN LiYi, ZHANG XinYi, SHEN HeQing. Chinese J. Anal. Chem., 2013, 41(1): 31-35
嚴麗娟, 張 潔, 潘晨松, 林立毅, 張欣怡, 申河清. 分析化學, 2013, 41(1): 31-35
12 LIN LiYi, YANG LiZhong, YAN LiJuan, CHEN LuPing, ZHOU Yu, XU DunMing. Journal of Food Safety and Quality, 2013, (3): 899-904
林立毅, 楊黎忠, 嚴麗娟, 陳鷺平, 周 昱, 徐敦明. 食品安全質量檢測學報, 2013, (3): 899-904
Simultaneous Determination of Seven Fluorescent Whitening
Agents in Food Contact Paper Package Materials by
High Performance Liquid Chromatography Tandem
Triple TOFHigh Resolution Mass Spectrometry
DU ZhiFeng1,2,4, XIAN YanPing1, LIU FuJian3, GUO XinDong*1, HUANG JinFeng1,
WU YuLuan1, LUO HaiYing1, WANG YongHua*4
1(Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute, Guangzhou 510110, China)
2(AB SCIEX Asia Pacific Application Support Center, Shanghai 200233, China)
3(Guangdong Testing Institute for Product Quality Supervision, Guangzhou 510330, China)
4(College of Light Industry and Food Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)
依照《中華人民共和國合同法》及其他有關法律、行政法規,遵循平等、自愿、公平和誠實信用的原則,雙方就本鑒定工程事項協商一致,訂立本合同。
一、 房屋鑒定工程概況
(一)房屋名稱:
(二)房屋地址:
(三)房屋鑒定原因:
二、房屋鑒定工程范圍
(一)甲方工作內容:
1、向乙方提交《鑒定委托書》及以下資料(已提交的打“√”):
(1)甲方身份證明材料;
(2)房屋所有權證、租賃合同、代管或者托管協議;
(3)房屋設計資料;
(4)地質勘察資料;
(5)施工技術檔案;
(6)房屋目前使用用途證明;
(7)提供相鄰房屋的相關材料。
2、乙方因檢測鑒定需要要求甲方提供的其他技術資料:
3、應于 年 月 日提供上述資料,并對其完整性、正確性及時限負責;
甲方不得要求乙方違反國家有關標準進行檢測鑒定。
4、提供鑒定現場的水源、電源及鑒定所需的工作面;
5、提供現場檢測的安全措施;
(二)乙方工作內容:
1、調查摸清房屋的歷史和現狀;
2、現場查勘、測試,記錄各種數據和狀況;
3、檢測、驗算,整理技術資料;
4、全面分析,論證定性,作出綜合判斷;
5、出具《房屋安全鑒定報告書》(檢測鑒定報告應包括相應的檢測數據);
6、將《房屋安全鑒定報告書》提交甲方,由甲方向 市(區、縣)建設、房地產行政主管部門辦理《房屋安全鑒定報告書》(一式五份)備案;
7、對鑒定報告中提出需加固、結構補強的,提供技術咨詢;
三、合同工期
(1)本合同簽訂后三日內,乙方必須進行現場查勘(指乙方工作內容的第1、2條);如因甲方原因造成乙方不能進駐現場,現場查勘時間順延;有明顯險情的房屋,乙方應于 年 月 日立即組織鑒定;
(2)乙方在開始現場查勘且甲方提交全部所需資料后 個工作日內,出具鑒定報告;
(3)房屋結構復雜、鑒定難度較大,在規定的時間內不能完成鑒定的,應當向甲方說明情況,另行簽定補充協議,并根據實際情況出具階段性鑒定文件。
四、質量標準
房屋安全鑒定主要依據國家行業標準《危險房屋鑒定標準》、國家標準《民用建筑可靠性鑒定標準》、《工業廠房可靠性鑒定標準》以及相關的國家、地方專業技術標準、規范和規程,以及建設部《城市危險房屋管理規定》。乙方應根據具體工程實際情況,確定檢測依據及標準。
五、 收費標準、鑒定面積、合同價款
(一)房屋安全鑒定費用:可按每平方米鑒定建筑面積 元計收。
(二)鑒定總面積: 平方米。
如果實際鑒定建筑面積與上款面積不符,則以實際鑒定建筑面積為準,并調整鑒定費用。
(三)鑒定費用總金額¥: 元(不含檢測、勘察費用)
(大寫): (人民幣)
六、付款方式
(一)甲乙雙方簽訂本合同后 天內,甲方付給乙方合同總金額的 % 。屬財政出資的,甲方可先行墊付。
(二)甲方收到乙方提交的《房屋安全鑒定報告書》后,甲方配合乙方辦理財政支付的相關手續,并結算合同價款。
(三)甲方自行出資的其他方式:
七、組成合同的文件
八、雙方責任
(一)甲方
應提交乙方的全部所需資料超過規定期限 天以內,乙方按本合同第三條規定交付鑒定報告的時間順延;甲方交付上述資料超過規定期限 天以上時,乙方有權重新確定提交鑒定報告的時間。(不能提供主要資料的,乙方有能力通過檢測等技術手段完成鑒定的,可約定)
(二)乙方
1、未按合同工期提交報告時,每延誤一天,罰款300元。
2、負責鑒定報告的質量。因弄虛作假、計算錯誤等乙方原因導致鑒定報告的鑒定結論與建筑物實際情況不符,造成經濟損失及安全事故,應退還鑒定費用,免收受損失部分的檢測鑒定費,并承擔相應的法律責任。
九、有關事宜
(一)本合同執行過程中發生爭議,甲乙雙方應及時協商解決。如雙方協商不成,經雙方同意,可向市(區、縣)建設、房地產行政主管部門申請調解。
(二)未盡事宜,經雙方協商一致,簽訂補充協議。
(三)雙方的協商補充條款、補充協議與本合同均具效力。
(四)本合同經甲乙雙方鑒字蓋章即時生效。
(五)本合同正本一式四份,甲乙雙方及市、縣建設局(房管局)各執一份。
甲、乙雙方確定,在本合同有效期內,甲方指定 為甲方項目聯系人,乙方指定 為乙方項目聯系人,項目聯系人負責本項目進行過程中的協調工作,以使本項目順利進行。
十、 合同生效
合同訂立時間: 年 月 日 合同訂立地點:
本合同雙方約定: 后生效; 后失效。
第二條本辦法適用于全國河道(包括湖泊、人工水道、行洪區、蓄滯洪區)、灌排渠系、堤防(包括海堤)上依法修建的,由水利部門管理的大、中型水閘。
小型水閘、船閘和其它部門管轄的各類水閘參照執行。
第三條水閘實行定期安全鑒定制度。首次安全鑒定應在竣工驗收后5年內進行,以后應每隔10年進行一次全面安全鑒定。運行中遭遇超標準洪水、強烈地震、增水高度超過校核潮位的風暴潮、工程發生重大事故后,應及時進行安全檢查,如出現影響安全的異常現象的,應及時進行安全鑒定。閘門等單項工程達到折舊年限,應按有關規定和規范適時進行單項安全鑒定。
第四條國務院水行政主管部門負責全國水閘安全鑒定工作的監督管理。
縣級以上地方人民政府水行政主管部門負責本行政區域內所轄的水閘安全鑒定工作的監督管理。
流域管理機構負責其直屬水閘安全鑒定工作的監督管理,并對所管轄范圍內的水閘安全鑒定工作進行監督檢查。
第五條水閘管理單位負責組織所管轄水閘的安全鑒定工作(以下稱鑒定組織單位)。水閘主管部門應督促鑒定組織單位及時進行安全鑒定工作。
第六條縣級以上地方人民政府水行政主管部門和流域管理機構按分級管理原則對水閘安全鑒定意見進行審定(以下稱鑒定審定部門)。
省級地方人民政府水行政主管部門審定大型及其直屬水閘的安全鑒定意見;市(地)級及以上地方人民政府水行政主管部門審定中型水閘安全鑒定意見。
流域管理機構審定其直屬水閘的安全鑒定意見。
第七條水閘安全類別劃分為四類:
一類閘:運用指標能達到設計標準,無影響正常運行的缺陷,按常規維修養護即可保證正常運行。
二類閘:運用指標基本達到設計標準,工程存在一定損壞,經大修后,可達到正常運行。
三類閘:運用指標達不到設計標準,工程存在嚴重損壞,經除險加固后,才能達到正常運行。
四類閘:運用指標無法達到設計標準,工程存在嚴重安全問題,需降低標準運用或報廢重建。
第二章基本程序及組織
第八條水閘安全鑒定包括水閘安全評價、水閘安全評價成果審查和水閘安全鑒定報告書審定三個基本程序。
(一)水閘安全評價:鑒定組織單位進行水閘工程現狀調查,委托符合第十二條要求的有關單位開展水閘安全評價(以下稱鑒定承擔單位)。鑒定承擔單位對水閘安全狀況進行分析評價,提出水閘安全評價報告;
(二)水閘安全評價成果審查:由鑒定審定部門或委托有關單位,主持召開水閘安全鑒定審查會,組織成立專家組,對水閘安全評價報告進行審查,形成水閘安全鑒定報告書;
(三)水閘安全鑒定報告書審定:鑒定審定部門審定并印發水閘安全鑒定報告書。
第九條鑒定組織單位的職責:
(一)制訂水閘安全鑒定工作計劃;
(二)委托鑒定承擔單位進行水閘安全評價工作;
(三)進行工程現狀調查;
(四)向鑒定承擔單位提供必要的基礎資料;
(五)籌措水閘安全鑒定經費;
(六)其它相關職責。
第十條鑒定承擔單位的職責:
(一)在鑒定組織單位現狀調查的基礎上,提出現場安全檢測和工程復核計算項目,編寫工程現狀調查分析報告;
(二)按有關規程進行現場安全檢測,評價檢測部位和結構的安全狀態,編寫現場安全檢測報告;
(三)按有關規范進行工程復核計算,編寫工程復核計算分析報告;
(四)對水閘安全狀況進行總體評價,提出工程存在主要問題、水閘安全類別鑒定結果和處理措施建議等,編寫水閘安全評價總報告;
(五)按鑒定審定部門的審查意見,補充相關工作,修改水閘安全評價報告;
(六)其它相關職責。
第十一條鑒定審定部門的職責:
(一)成立水閘安全鑒定專家組;
(二)組織召開水閘安全鑒定審查會;
(三)審查水閘安全評價報告;
(四)審定水閘安全鑒定報告書并及時印發;
(五)其它相關職責。
第十二條大型水閘的安全評價,由具有水利水電勘測設計甲級資質的單位承擔。中型水閘安全評價,由具有水利水電勘測設計乙級以上(含乙級)資質的單位承擔。
經水利部認定的水利科研院(所),可承擔大、中型水閘的安全評價任務。
第十三條水閘安全鑒定審定部門組織的專家組應由水閘主管部門的代表、水閘管理單位的技術負責人和從事水利水電專業技術工作的專家組成,并符合下列要求:
(一)水閘安全鑒定專家組應根據需要由水工、地質、金屬結構、機電和管理等相關專業的專家組成;
(二)大型水閘安全鑒定專家組由不少于9名專家組成,其中具有高級技術職稱的人數不得少于6名;中型水閘安全鑒定專家組由7名及以上專家組成,其中具有高級技術職稱的人數不得少于3名;
(三)水閘主管部門所在行政區域以外的專家人數不得少于水閘安全鑒定專家組組成人員的三分之一;
(四)水閘原設計、施工、監理、設備制造等單位的在職人員以及從事過本工程設計、施工、監理、設備制造的人員總數不得超過水閘安全鑒定專家組組成人員的三分之一;
水閘安全鑒定專家組成員應當遵循客觀、公正、科學的原則履行職責,審查水閘安全評價報告,形成水閘安全鑒定報告書。
第十四條流域機構、省級水行政主管部門應按年度匯總所管轄的大、中型水閘安全鑒定報告書,并于每年年底前報送水利部備案。
第三章工作內容
第十五條水閘安全鑒定工作內容應按照《水閘安全鑒定規定》(SL214-98)執行,工作內容包括現狀調查、現場安全檢測、工程復核計算、安全評價等。
第十六條現狀調查應進行設計、施工、管理等技術資料收集,在了解工程概況、設計和施工、運行管理等基本情況基礎上,初步分析工程存在問題,提出現場安全檢測和工程復核計算項目,編寫工程現狀調查分析報告。
第十七條現場安全檢測包括確定檢測項目、內容和方法,主要是針對地基土和填料土的基本工程性質,防滲導滲和消能防沖設施的有效性和完整性,混凝土結構的強度、變形和耐久性,閘門、啟閉機的安全性,電氣設備的安全性,觀測設施的有效性等,按有關規程進行檢測后,分析檢測資料,評價檢測部位和結構的安全狀態,編寫現場安全檢測報告。
第十八條工程復核計算應以最新的規劃數據、檢查觀測資料和安全檢測成果為依據,按照有關規范,進行閘室、岸墻和翼墻的整體穩定性、抗滲穩定性、抗震能力、水閘過水能力、消能防沖、結構強度以及閘門、啟閉機、電氣設備等復核計算,編寫工程復核計算分析報告。
第十九條安全評價應在現狀調查、現場安全檢測和工程復核計算基礎上,充分論證數據資料可靠性和安全檢測、復核計算方法及其結果的合理性,提出工程存在的主要問題、水閘安全類別評定結果和處理措施建議,并編制水閘安全評價總報告。
第二十條水閘主管部門及管理單位對鑒定為三類、四類的水閘,應采取除險加固、降低標準運用或報廢等相應處理措施,在此之前必須制定保閘安全應急措施,并限制運用,確保工程安全。
第二十一條經安全鑒定,水閘安全類別發生改變的,水閘管理單位應在接到水閘安全鑒定報告書之日起3個月內,向水閘注冊登記機構申請變更注冊登記。
第二十二條鑒定組織單位應當按照檔案管理的有關規定,及時對水閘安全評價報告和水閘安全鑒定報告書等資料進行歸檔,并妥善保管。
第四章附則