藥理學(xué)的研究方法匯總十篇

序論：好文章的創(chuàng)作是一個(gè)不斷探索和完善的過程，我們?yōu)槟扑]十篇藥理學(xué)的研究方法范例，希望它們能助您一臂之力，提升您的閱讀品質(zhì)，帶來更深刻的閱讀感受。

篇（1）

1 目前藥理學(xué)教學(xué)存在的問題

藥理學(xué)課程學(xué)習(xí)有一點(diǎn)難度，首先他是一門綜合課程，需要前提有扎實(shí)的人體解剖生理學(xué)，生物化學(xué)，微生物學(xué)等基礎(chǔ)知識(shí)，同時(shí)也要懂一些基本的病理生理學(xué)和疾病的基本知識(shí)，還需要聯(lián)系藥物化學(xué)課程的一些諸如構(gòu)效知識(shí)等；其次藥理學(xué)章節(jié)繁多，藥物類別、藥名繁多、學(xué)術(shù)術(shù)語多、記憶的知識(shí)點(diǎn)多，是四大藥學(xué)核心課程中學(xué)習(xí)難道相對(duì)較大的。本課程基本涵蓋了臨床常用的大部門藥物，教學(xué)內(nèi)容多，藥物的藥理作用和作用機(jī)制理解有一定難度，藥名名稱也不容易記憶。教學(xué)資源、教學(xué)模式單一，使得抽象的知識(shí)變得更加枯燥難懂，降低課堂學(xué)習(xí)效率。

2 教學(xué)方法改革方案和目標(biāo)

針對(duì)目前藥理學(xué)教學(xué)存在的問題，提出課程的教學(xué)改革方案。

1）針對(duì)學(xué)時(shí)減少，前期基礎(chǔ)薄弱特點(diǎn)，刪減相關(guān)臨床不常用的藥物章節(jié)，刪減難度較大的部門藥物的藥理作用和作用機(jī)制章節(jié)。

2）將難度大的章節(jié)的藥理作用和作用機(jī)制通過圖表、動(dòng)畫等形式講解，力求生動(dòng)形象清晰，同時(shí)講部分機(jī)制簡化。

3）增加多種教學(xué)方法，引入比較法、圖表法、案例教學(xué)法。

改革目標(biāo)：

（1）通過本課程的學(xué)習(xí)，要求學(xué)生熟悉常用藥物的作用機(jī)制、藥理作用、臨床應(yīng)用。理解該藥物為什么能治療某類疾病，如何合理使用。

（2）識(shí)記了大量藥名，為相關(guān)專業(yè)課程藥物化學(xué)、藥物制劑提供一些專業(yè)基礎(chǔ)。為后期藥師、執(zhí)業(yè)藥師考試做好相應(yīng)知識(shí)儲(chǔ)備。

擬解決的關(guān)鍵問題：將藥理學(xué)課程由抽象復(fù)雜轉(zhuǎn)化為生動(dòng)形象，豐富課堂教?W內(nèi)容，調(diào)動(dòng)學(xué)生的能動(dòng)性，提高課堂效率，使學(xué)生能切實(shí)提高實(shí)際應(yīng)用能力[2]。

針對(duì)學(xué)科特點(diǎn)，結(jié)合多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和學(xué)生學(xué)習(xí)的反饋情況，擬對(duì)藥理學(xué)的的教學(xué)方案做一些改革和探索。

3 教學(xué)內(nèi)容模塊化的整合

按照藥物的分類以及課程特點(diǎn)，刪除臨床不常使用的藥物的章節(jié)，同時(shí)將臨床常用的重要的藥理學(xué)內(nèi)容的幾十個(gè)章節(jié)整合分成七大模塊進(jìn)行教學(xué)[3]。每個(gè)模板內(nèi)部再分成幾個(gè)有機(jī)聯(lián)系的單元，使學(xué)生能夠融會(huì)貫通的掌握各個(gè)模塊內(nèi)部的知識(shí)，同時(shí)注意區(qū)分各章節(jié)藥物的差別，便于學(xué)生記憶和復(fù)習(xí)。具體如下

3.1 藥理學(xué)總論模塊

1）緒論；2）藥物效應(yīng)動(dòng)力學(xué)；3）藥物代謝動(dòng)力學(xué)；4）影響藥物作用的因素

3.2 作用于傳出神經(jīng)系統(tǒng)的藥物模塊

1）概論；2）膽堿受體激動(dòng)藥及膽堿酯酶抑制藥；3）膽堿受體阻斷藥；4）腎上腺素受體激動(dòng)藥；5）腎上腺素受體阻斷藥

3.3 作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物的模塊模塊

1）鎮(zhèn)靜催眠藥；2）抗癲癇藥和抗驚厥藥；3）抗精神失常藥；4）解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥；5）鎮(zhèn)痛藥

3.4 作用于心血管系統(tǒng)的藥物模塊

1）抗心絞痛藥；2）抗高血壓藥；3）抗心律失常藥；4）抗慢性心功能不全藥；5）調(diào)血脂藥

3.5 作用于內(nèi)臟系統(tǒng)的藥物模塊

1）利尿藥和脫水藥；2）呼吸系統(tǒng)藥；3）消化系統(tǒng)藥物；4）作用于血液系統(tǒng)藥物；5）抗組胺藥

3.6 作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)的藥物模塊

1）胰島素和口服降糖藥；2）腎上腺素皮質(zhì)激素藥物；3）甲狀腺激素及抗甲狀腺藥；4）性激素

3.7 化學(xué)治療藥物模塊

1）β-內(nèi)酰胺類；2）大環(huán)內(nèi)酯類；3）氨基苷類；4）四環(huán)素類和氯霉素類；5）人工合成抗菌藥：磺胺類藥、喹諾酮類；6）抗真菌藥；7）抗病毒藥；8）抗結(jié)核藥；9）抗寄生蟲藥；10）抗惡性腫瘤藥

4 教學(xué)單元的優(yōu)化設(shè)計(jì)

對(duì)于每個(gè)教學(xué)單元，采用項(xiàng)目化教學(xué)法，總體設(shè)計(jì)中已經(jīng)講教學(xué)內(nèi)容按照疾病類型分為七大模塊，模塊內(nèi)部再將章節(jié)細(xì)化，每一類藥物的學(xué)習(xí)設(shè)定為一個(gè)教學(xué)單元，采用以下方案。

1）導(dǎo)入：用該章節(jié)藥物在藥物發(fā)現(xiàn)歷史上的故事，如諾貝爾獎(jiǎng)的故事或者相關(guān)歷史人物趣聞或者相關(guān)生活趣味點(diǎn)等導(dǎo)入，增加學(xué)生學(xué)習(xí)興趣[4]。

2）通過藥理作用和作用機(jī)制的講解，解釋清楚為什么此類藥物能治療這種疾病，讓學(xué)生有一種豁然開朗的感覺，覺得這個(gè)課程學(xué)的有意思。

3）介紹各類藥物在臨床上如何合理選用，貼近生活實(shí)際，使學(xué)生覺得該課程有一定的實(shí)際意義。

4）小結(jié)：總結(jié)重點(diǎn)難點(diǎn)，布置課后任務(wù)。

5 課堂教學(xué)方法改革

1）項(xiàng)目化教學(xué)法[5]：根據(jù)崗位需求特點(diǎn)，對(duì)常見病，如高血壓，糖尿病等采用項(xiàng)目化教學(xué)法，讓學(xué)生掌握常見病幾大類藥物的合理選用，使學(xué)生能獨(dú)立面對(duì)崗位。如高血壓有常見一線五大類藥物，通過圖表等多種方法，讓學(xué)生掌握五類一線藥物的臨床用途及不良反應(yīng)，面對(duì)高血壓病人能詳細(xì)介紹各類藥物特點(diǎn)，使病人用藥放心，安心。

2）案例教學(xué)法：鑒于傳統(tǒng)填鴨式教學(xué)法學(xué)生死記硬背，老師課堂獨(dú)角戲的局面，在介紹完每類藥物之后，給出具體病例，讓學(xué)生針對(duì)病例，合理選藥，增加課堂趣味性和實(shí)際應(yīng)用性。

3）比較教學(xué)法：對(duì)于部分內(nèi)容相似度高，學(xué)生不易掌握的章節(jié)采用比較法。如心血管系統(tǒng)，高血壓、心絞痛、心律失常等相似度高，不易區(qū)分的章節(jié)，適當(dāng)增加學(xué)時(shí)，增加案例。哪些藥物可以同時(shí)治療三中疾病，哪些藥物只能治療其中一種疾病，進(jìn)行區(qū)分。

篇（2）

【關(guān)鍵詞】 分光光度法； 色譜法； 免疫法； 同位素法； 微生物法

中藥藥代動(dòng)力學(xué)是近20年迅速發(fā)展起來的以中醫(yī)藥基本理論為指導(dǎo)，用藥物動(dòng)力學(xué)方法研究中藥在動(dòng)物或人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和消除過程的一門新興邊緣學(xué)科。血藥濃度法［1］是藥物動(dòng)力學(xué)研究的經(jīng)典方法，是計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)最常用最準(zhǔn)確的測定方法，所以血藥濃度準(zhǔn)確的測定是中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。先進(jìn)的測定方法是精確測定的前提，發(fā)展更先進(jìn)、更合適的測定方法是中藥面向現(xiàn)代化、面向世界的必經(jīng)之路。

1 利用原子和分子對(duì)不同激發(fā)光譜的吸收特性，來鑒別確定指標(biāo)成分

1.1 分光光度法［2］

包括紫外-可見分光光度法，熒光分光光度法及原子吸收光譜法。分光光度法儀器設(shè)備簡單、投資少、成本低、操作方便，只要有一定吸收光譜的物質(zhì)均能測得。曹蔚等［3］人用紫外分光光度法測定紅花黃色素在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果表明：紅花黃色素在健康家兔體內(nèi)為一室模型，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：曲線下面積（AUC）為40 192.6μg·min-1·ml-1，半衰期為44.0min，消除速率常數(shù)為0.016/min，腎清除率為1.22ml/min。但分光光度法靈敏度較低，對(duì)體內(nèi)許多內(nèi)源性物質(zhì)難以區(qū)分，所以分光光度法常與色譜法聯(lián)用，目前紫外分光光度法和熒光分光光度法被廣泛用作高效液相色譜儀的檢測手段。

1.2 色譜法

包括薄層層析法、薄層掃描法、氣相色譜法、氣相-質(zhì)譜聯(lián)用，高效液相色譜法（單維、二維、三維、熒光）液相-質(zhì)譜聯(lián)用。色譜法尤其是高效液相色譜法，經(jīng)過多年發(fā)展已趨于完善，其穩(wěn)定性、可操作性、準(zhǔn)確性、靈敏度均有了較大的提高，成為色譜法的代表。

1.2.1 薄層層析法

層析法是分析研究中最常用的分離手段，薄層層析是層析分離中應(yīng)用最為普遍的方法之一。周繼紅等［4］用HP-TLC法測定了血清中大黃有效成分的含量。薄層層析分離效率高，不易受溶劑和雜質(zhì)的干擾，其缺點(diǎn)是線性范圍較窄，操作技術(shù)要求較高。

1.2.2 薄層掃描法

薄層掃描法系指用一定波長的光照射在經(jīng)薄層層析后的層析板上，對(duì)具有吸收或能產(chǎn)生熒光的層析斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，用反射法或透射法測定吸收的強(qiáng)度，以檢測層析譜。對(duì)于中成藥復(fù)方制劑，亦可用相應(yīng)的原藥材按需要組合作陰、陽對(duì)照，然后比較其薄層掃描圖譜加以鑒別。使用儀器為薄層掃描儀。賀浪沖等［5］用固相萃取-薄層掃描法測定兔血清中青藤堿濃度，他們用自制硅膠萃取柱及萃取儀，將血清中青藤堿凈化后，點(diǎn)樣于硅膠G硅膠GF254（2∶1）薄層板上，以氯仿甲醇（19∶2）為展開劑，在島津CS-930上，用雙波長（λS275nm ，λR320nm）鋸齒法掃描測定。結(jié)果表明：血清中青藤堿的固相提取回收率為（96.95±7.59）%，用薄層掃描法測繪了兩只家兔靜注青藤堿后的藥物濃度-時(shí)間曲線，青藤堿的薄層掃描測定法靈敏、準(zhǔn)確。

1.2.3 氣相色譜法（GC）

GC是一種高效能、高選擇性、高靈敏度、操作簡單、應(yīng)用廣泛的分離分析方法。在生物堿的血藥濃度測定方面應(yīng)用較多，如郭軍等［6］用GC-FID法測定人含服速效救心丸后血中冰片、川芎嗪含量。不同時(shí)間點(diǎn)取健康志愿者含服速效救心丸后的血漿并分別測定其冰片、川芎嗪濃度，經(jīng)3P97軟件處理數(shù)據(jù)得其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。測得健康人血漿中兩種成分線性范圍為20～420 ng/ml，線性關(guān)系良好，健康人含服速效救心丸后血漿中體內(nèi)藥時(shí)過程符合開放性一室模型，吸收、分布、排泄較為迅速。但GC法受樣品揮發(fā)性的限制，實(shí)際應(yīng)用的比例很小。

1.2.4 氣相-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）

GC-MS聯(lián)用分析的靈敏度高、特異性強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)簡單高效，適合于低分子化合物分析，尤其適合于揮發(fā)性成分的分析，特別在中藥揮發(fā)性成分的鑒定等方面。如楊赴云等［7］用氣相- 質(zhì)譜聯(lián)用法測定大耳白兔中銀杏內(nèi)酯的血藥濃度，計(jì)算其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明：大耳白兔靜脈注射銀杏內(nèi)酯A、B后代謝符合二房室模型。

1.2.5 高效液相色譜法（HPLC）

高效液相色譜法（High performance liquid chromatography，HPLC）是在20世紀(jì)60年代末期，在經(jīng)典液相色譜法和氣相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型分離分析技術(shù)，其采用高效固定相，以高壓輸送流動(dòng)相，并配有各種檢測器，使分離與測定組成一個(gè)統(tǒng)一系統(tǒng)。HPLC法具有適用范圍廣、分離效能好、分析速度快、流動(dòng)相可選擇范圍寬、靈敏度及特異性高、高度自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，自20世紀(jì)80年代用于中草藥藥代動(dòng)力學(xué)研究以來，現(xiàn)已成為中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究的主要手段［8］。其中反相高效液相色譜因條件溫和、分離度好、適應(yīng)性廣、樣品前處理簡單、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，在實(shí)踐中被廣泛應(yīng)用。一般應(yīng)根據(jù)目標(biāo)成分選擇不同的檢測器，最常用的是紫外-可見光譜檢測器，若采用電化學(xué)或質(zhì)譜作檢測器則可使靈敏度提高幾個(gè)數(shù)量級(jí)，但儀器過于昂貴限制了使用。

如李向陽等［9］采用 RP-HPLC法測定大鼠血漿中龍膽苦苷藥物濃度，色譜柱為 Lichrospher C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)相為甲醇-水（33∶67，V/V），結(jié)果表明：在1～20 mg/L范圍內(nèi)龍膽苦苷峰面積與濃度線性關(guān)系良好（r=0.999 7），最低可定量濃度為0.03 mg/L，絕對(duì)回收率為88.4%～96.2%，準(zhǔn)確度為97.8%～104.9%，日內(nèi)、日間RSD均小于10%。Kontani A等［10］用HPLC-ED測定大鼠體內(nèi)黃芩苷和黃酮的血藥濃度，結(jié)果顯示黃芩苷和黃酮的血藥濃度與注射劑量分別在2.2 pg～4.5 ng，1.4 pg～2.7 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

孟憲生等［11］采用HPLC-FLU法研究家犬血漿中羌活提取物異歐前胡素的藥代動(dòng)力學(xué)，采用藥代動(dòng)力學(xué)軟件DAS（ver2.0）處理，得到異歐前胡素的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。色譜柱為Phenomenex ODS（4.6 mm×250 mm）；流動(dòng)相為乙腈-0.025 mol/L磷酸水溶液（1∶1）；流速為1.0 ml/min；熒光檢測Ex=310nm，Em=480nm。結(jié)果表明：異歐前胡素在家犬體內(nèi)的代謝過程符合一室模型，吸收消除較快。

1.2.6 高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）

HPLC-MS聯(lián)用是將高效液相色譜儀與質(zhì)譜儀用界面連接成一個(gè)完整的儀器，實(shí)現(xiàn)在線檢測［12］。HPLC-MS法具有高度的專屬性，對(duì)多數(shù)藥物的檢測靈敏度超過其他分析方法，使定量測試速度顯著加快，可以對(duì)混合物中的微量組分進(jìn)行分析，已成為藥物分析中的主流技術(shù)。如張蕾等［13］用HPLC-MS法同時(shí)測定大鼠血漿中苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿的濃度及其藥代動(dòng)力學(xué)，血漿樣品經(jīng)氯仿液-液萃取后，以乙腈-0.1%甲酸水溶液（10:90）為流動(dòng)相，用Kromasil C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm）分離，采用電噴霧離子化源（ESI）單重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜，以選擇離子檢測（SM）方式進(jìn)行檢測。該法快速、靈敏、專屬、適用于同時(shí)測定生物樣本中苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿的血藥濃度。

HPLC-MS聯(lián)用法對(duì)不同的藥物分子，隨著離子化程度的難易其檢測靈敏度存在很大差異。對(duì)有機(jī)堿藥物的靈敏度最高定量限可達(dá)ng/ml或更低；對(duì)酸性、中性藥物的靈敏度依次降低；對(duì)烴類化合物則沒有信號(hào)響應(yīng)，這是該法應(yīng)用的最大局限［14］。

2 免疫分析法

免疫分析法的基礎(chǔ)是免疫反應(yīng)，即抗原與抗體結(jié)合，形成抗原－抗體結(jié)合物。這種結(jié)合是疏松、可逆的，利用樣品中待測藥物與標(biāo)記藥物之間的競爭，使標(biāo)記藥物從標(biāo)記的抗原－抗體結(jié)合物上被取代，其取代量與加入的待測藥物的量相關(guān)，通過測定被取代的標(biāo)記藥物來定量分析待測藥物。主要包括放射免疫法和酶聯(lián)免疫法。免疫法有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，操作簡單，適用于對(duì)大分子物質(zhì)的檢測，但對(duì)于許多內(nèi)源性相似物質(zhì)的辨別能力有待提高。曲靜偉等［15］采用自動(dòng)熒光偏振免疫法測定血清中地高辛的濃度，結(jié)果表明：在成年患者中84.6%例次的血清地高辛濃度在有效治療范圍（0.5～2.0 ng/ml），7.5%例次超過中毒濃度，7.9%例次低于最低有效濃度。可以得到對(duì)于腎功能正常或基本正常的成年患者，地高辛的日劑量不宜大于0.25 mg/d。

2.1 放射免疫法（RIA）

放射免疫法是利用同位素標(biāo)記的與未標(biāo)記的抗原，同抗體發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)的方法，研究機(jī)體對(duì)抗原物質(zhì)反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)化規(guī)律。RIA靈敏度高，專一性強(qiáng)，取樣量少，簡單易行，可廣泛用于體液及組織微量激素、蛋白質(zhì)、維生素和藥物等的測定。在中藥藥代動(dòng)力學(xué)的測定中也有較好的應(yīng)用。如劉曙光等［16］應(yīng)用了放射免疫測定法來測定口服黃夾次苷甲、乙和黃夾苷后的藥代動(dòng)力學(xué)。

2.2 酶聯(lián)免疫法（EIA）

［17］EIA由于標(biāo)記物的多樣性，使其應(yīng)用范圍更廣且無同位素污染。在均相酶免疫測定中，因不需分離使操作更方便、快速，廣泛用于抗生素、抗癲癇藥、平喘藥、心血管系統(tǒng)藥等多種藥物的測定和藥物濫用的監(jiān)測。

3 同位素標(biāo)記法

同位素標(biāo)記法（Isotopic tracer method）是利用放射性核素（或穩(wěn)定性核素）作為示蹤劑對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行標(biāo)記的微量分析方法。同位素示蹤所利用的放射性核素（或穩(wěn)定性核素）及它們的化合物，與自然界存在的相應(yīng)普通元素及其化合物之間的化學(xué)性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)是相同的，只是具有不同的核物理性質(zhì)。因此，就可以用同位素作為一種標(biāo)記，制成含有同位素的標(biāo)記化合物（如標(biāo)記食物，藥物和代謝物質(zhì)等）代替相應(yīng)的非標(biāo)記化合物。

3.1 放射性同位素標(biāo)記法

利用放射性同位素不斷地放出特征射線的核物理性質(zhì)，就可以用核探測器隨時(shí)追蹤它在體內(nèi)或體外的位置、數(shù)量及其轉(zhuǎn)變等，放射性同位素與其它測定方法聯(lián)用可以很好的完成中藥代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的血藥濃度測定。用放射性同位素作為示蹤劑不僅靈敏，測量方法也簡便易行，能準(zhǔn)確地定量，定位且符合所研究對(duì)象的生理?xiàng)l件等特點(diǎn)，但放射性同位素法對(duì)環(huán)境有污染，因而實(shí)際應(yīng)用較少。

3.2 穩(wěn)定性同位素標(biāo)記法

穩(wěn)定性同位素雖然不釋放射線，但可以利用它與普通相應(yīng)同位素的質(zhì)量之差，通過質(zhì)譜儀，氣相色譜儀，核磁共振等質(zhì)量分析儀器來測定。但穩(wěn)定性同位素作為示蹤劑其靈敏度較低，可獲得的種類少，價(jià)格較昂貴，其應(yīng)用范圍受到限制。

4 微生物法［18］

具有抗菌活性的中藥復(fù)方制劑，如黃連解毒湯、清瘟敗毒飲、大黃牡丹皮湯劑等，可以利用微生物法測定體液樣品的濃度，然后擬合模型計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。潘嘉等［19］采用抑菌效應(yīng)法測定川芎揮發(fā)油藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明：川芎揮發(fā)油的藥動(dòng)學(xué)過程符合一室開放模型。

上述測定方法多是對(duì)中藥有效成分的血藥濃度測定，在某些情況下，有效成分可以代表中藥復(fù)方，但大多數(shù)情況下中藥復(fù)方中的成分復(fù)雜且不清楚，單一成分不能完全代表其作用。現(xiàn)在有很多人測定多種單體成分的血藥濃度以避免脫離中醫(yī)藥整體觀念思想，但是這種方法耗時(shí)耗力也并不一定能代表所有成分。為了更好的研究中藥復(fù)方的藥動(dòng)學(xué)，中外學(xué)者提出了很多假說［20］，比較有代表性的有“證治藥動(dòng)學(xué)”新假說［21］，“復(fù)方效應(yīng)成分動(dòng)力學(xué)”新假說［22］，“辨證藥動(dòng)學(xué)”假說［17］，“中藥胃腸藥動(dòng)學(xué)”［17］和“血清藥理學(xué)”［23］等。但這些假說都比較片面，不能全面的說明問題。

研究中藥制劑的藥動(dòng)學(xué)是中醫(yī)藥發(fā)展的趨勢，對(duì)推動(dòng)中醫(yī)藥學(xué)科的發(fā)展，促進(jìn)中藥現(xiàn)代化和中藥走向世界具有極為重要的意義。為了能更好地為中藥藥代動(dòng)力學(xué)服務(wù)，發(fā)展更高效、更靈敏的測定方法勢在必行。

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篇（3）

[收稿日期] 2013-12-26

傳統(tǒng)中醫(yī)臨床用藥的主要形式和手段是方劑，而方劑的本質(zhì)是各組分間的配伍。方劑配伍規(guī)律研究的內(nèi)容主要是依據(jù)中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論，為達(dá)到防治疾病目的，而將兩味或兩味以上具有一定協(xié)同或拮抗作用的中藥配合應(yīng)用的藥物間聯(lián)系或內(nèi)在規(guī)律。方劑配伍規(guī)律內(nèi)涵的揭示是中醫(yī)藥現(xiàn)代化的要求，同時(shí)也是中醫(yī)藥走向國際化的必備要素，可為我國獨(dú)立自主的知識(shí)產(chǎn)權(quán)與專利保護(hù)提供有力的科學(xué)依據(jù)。近年來，越來越多的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法應(yīng)用于中藥復(fù)方配伍規(guī)律的研究，如復(fù)方配伍前后、不同配伍方法下藥物化學(xué)成分[1-4]、藥理作用[5-7]的變化規(guī)律和機(jī)制；采用血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)，揭示中藥復(fù)方在體內(nèi)發(fā)揮療效的活性物質(zhì)[8-10]；復(fù)方藥物在體內(nèi)的代謝規(guī)律[11-13]；中藥復(fù)方譜效關(guān)系研究[14-15]等。而運(yùn)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)、數(shù)學(xué)模型等方法作為定量化分析與推斷數(shù)據(jù)資料、探究事物內(nèi)在規(guī)律的手段，從數(shù)學(xué)關(guān)系的角度對(duì)復(fù)方配伍規(guī)律進(jìn)行闡述，既有助于科學(xué)認(rèn)識(shí)復(fù)方配伍的實(shí)質(zhì)，也有助于中藥新藥復(fù)方科學(xué)化組方，在揭示中藥復(fù)方配伍規(guī)律內(nèi)涵的研究方面起到了重要的作用。

目前對(duì)中藥方劑配伍規(guī)律的數(shù)理統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究主要集中在：數(shù)據(jù)處理和實(shí)驗(yàn)研究兩方面。其中數(shù)據(jù)處理包括：數(shù)據(jù)挖掘、聚類分析、因子分析、主成分分析、相關(guān)分析、回歸分析、方差分析等；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括：全方研究、撤藥研究、直接實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、單味研究、藥對(duì)研究、正交設(shè)計(jì)法、均勻設(shè)計(jì)、析因設(shè)計(jì)法、正交與均勻聯(lián)合設(shè)計(jì)法等。利用現(xiàn)代數(shù)理統(tǒng)計(jì)理論方法與技術(shù)研究中藥方劑配伍規(guī)律和內(nèi)涵，一方面可以促進(jìn)處方配伍配比的優(yōu)化篩選，充分提高中藥材的藥物療效，另一方面還將促進(jìn)我國中醫(yī)藥事業(yè)走向現(xiàn)代化國際化，使中藥方劑更易于被國際醫(yī)藥界所接受。本文就數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法在中藥復(fù)方配伍研究中的應(yīng)用，從方藥配伍劑量優(yōu)化、中藥配伍作用規(guī)律、中藥配伍禁忌規(guī)律等方面進(jìn)行綜述。

1 方藥劑量配伍優(yōu)化研究

方劑療效是復(fù)方藥物相互作用所表現(xiàn)的綜合結(jié)果。其中，影響方劑療效的兩大因素是復(fù)方的藥味組成與藥量配比。復(fù)方劑量配比優(yōu)化不僅可以對(duì)處方藥物進(jìn)行優(yōu)化篩選，提高藥物療效，同時(shí)也是中藥新藥開發(fā)的重要任務(wù)之一。基于此需求，許多學(xué)者利用不同的數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法對(duì)中藥劑量配伍優(yōu)化進(jìn)行了較多的研究。

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法

1.1.1 正交設(shè)計(jì)法 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)是為尋求最優(yōu)化水平組合的一種高效的多因素實(shí)驗(yàn)。其特點(diǎn)表現(xiàn)在不僅消除了各效應(yīng)間的相關(guān)性，使得藥物各因素及其交互作用對(duì)指標(biāo)的影響大小和變化規(guī)律更易于估計(jì)，即正交性；而且可以通過部分試驗(yàn)的結(jié)果反映全面實(shí)驗(yàn)的情況，便于數(shù)據(jù)結(jié)果的分析，即代表性。基于這兩方面的特點(diǎn)，正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)已被廣泛應(yīng)用于中藥復(fù)方的組分優(yōu)化篩選等方面。趙學(xué)軍等[16]采用正交設(shè)計(jì)法對(duì)溫腎咳喘片各組分的最佳劑量配伍進(jìn)行了研究，得出其提取物的最佳配比為厚樸-蛇床子-甘草提取物4∶3∶3，并且按此比例制成的制劑有明顯的藥理作用，說明該組方劑量合理。張萬龍等[17]采用正交試驗(yàn)對(duì)澤瀉湯加味方進(jìn)行最佳組分配伍研究，結(jié)果得出了澤瀉湯加味方最佳降壓效果的最優(yōu)藥用劑量為澤瀉 21 g，炒白術(shù) 9 g，澤蘭、石菖蒲各15 g。姚干等[18]采用正交設(shè)計(jì)法配合多藥效指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)，篩選出具有保肝和免疫調(diào)節(jié)作用的二至丸有效部位群組方，其最佳劑量比為女貞子總皂苷-女貞子多糖-墨旱蓮黃酮 58∶367∶18（質(zhì)量單位以mg計(jì)）。汪珊珊等[19]基于正交試驗(yàn)對(duì)由麻黃、杏仁和甘草三味藥組成的三拗湯進(jìn)行了最優(yōu)配比的研究，結(jié)果最佳配比為麻黃6 g，杏仁9 g，甘草3 g，其主次關(guān)系為麻黃>杏仁>甘草，表明優(yōu)選配比三拗湯對(duì)哮喘模型各指標(biāo)均表現(xiàn)出明顯的改善作用。此外，許多學(xué)者[20-26]還采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)對(duì)復(fù)方藥物劑量配伍進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究與數(shù)據(jù)處理，從而優(yōu)化藥味和藥量的最佳配比，以一個(gè)新的角度為劑量配伍優(yōu)選從飲片配伍研究過渡到組分配伍研究提供了數(shù)據(jù)依據(jù)和方法參考。然而，相比于復(fù)方劑量配比優(yōu)化的特殊要求，目前的正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)還未能實(shí)現(xiàn)多目標(biāo)優(yōu)化，并同時(shí)具備良好的非線性擬合能力以及完善的試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，僅限于研究藥味組成較為簡單的處方，這對(duì)復(fù)方優(yōu)化的效果及其優(yōu)勢的發(fā)揮都造成了一定的影響。

1.1.2 均勻設(shè)計(jì)法 相比于為了實(shí)現(xiàn)整齊可比性而導(dǎo)致每個(gè)因素的各水平必須重復(fù)，從而使得試驗(yàn)點(diǎn)相應(yīng)增多的正交設(shè)計(jì)法而言，同樣作為一種篩選研究手段的均勻設(shè)計(jì)方法，在實(shí)驗(yàn)過程中僅考慮實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的均勻分散性，因而不會(huì)受因素?cái)?shù)、因素水平的限制，實(shí)驗(yàn)次數(shù)可明顯減少，而不導(dǎo)致試驗(yàn)所反映的信息量減少，適用于多因素多水平的試驗(yàn)研究。均勻設(shè)計(jì)法近年來被學(xué)者廣泛應(yīng)用于復(fù)方劑量配伍優(yōu)化實(shí)驗(yàn)研究。興等[27]采用均勻設(shè)計(jì)法對(duì)降尿酸方主效應(yīng)中藥的最佳配伍進(jìn)行研究探討，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示黃柏、秦皮及桑寄生三味中藥組合是降尿酸的最佳配伍組合，而且實(shí)驗(yàn)明確了其最佳的劑量配伍分別為50，260，50 mg?kg-1。唐亞軍等[28]通過均勻設(shè)計(jì)法對(duì)防治脂肪肝的復(fù)方中藥“祛濕化瘀方”有效組分或單體（綠原酸、梔子苷、姜黃素、虎杖苷、白術(shù)多糖）進(jìn)行篩選和驗(yàn)證研究，結(jié)果表明運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)篩選獲得的組分方（梔子苷、綠原酸）對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠肝臟脂肪沉積及肝損傷具有顯著的防治作用。賀燕等[29]采用均勻設(shè)計(jì)法探討三七及山楂組合物中有效部位的最佳劑量配伍，實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出山楂葉總黃酮與三七葉總皂苷的最佳組合比例為20∶15，并且在此條件下藥效作用明顯，說明運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)與藥理學(xué)動(dòng)物模型相結(jié)合的方法對(duì)中藥復(fù)方進(jìn)行研究是可行的。曾曉會(huì)等[30]采用均勻設(shè)計(jì)法尋找姜黃素與胡椒堿的最佳配比，結(jié)果顯示在姜黃素為13 mg?kg-1和胡椒堿為5.81 mg?kg-1時(shí)可使姜黃素和胡椒堿有最大的降三酰甘油效應(yīng)。高鵬等[31]應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)處理方法對(duì)丹心痛各味藥所占比例進(jìn)行篩選，從而確定川芎、香附、冰片、丹皮酚4種成分在復(fù)方中的最佳配比為5∶1.7∶1.4∶4.4（原提取物的質(zhì)量比），劑量為138 mg?kg-1（折生藥2.78 g?kg-1），證明均勻設(shè)計(jì)作為有效優(yōu)化復(fù)方最佳劑量方法的可行性。基于均勻設(shè)計(jì)法可以更全面更充分地優(yōu)化復(fù)方中劑量配伍的關(guān)系，許多學(xué)者都在這方面做了很多研究[32-37]，這為我國現(xiàn)代中醫(yī)藥優(yōu)化劑量配伍研究提供了很好的篩選手段與技術(shù)支持。雖然均勻設(shè)計(jì)法在一定程度上克服了早期試驗(yàn)設(shè)計(jì)的諸多弊端，明顯減少了試驗(yàn)次數(shù)，提高了實(shí)驗(yàn)效率，但其僅考慮了均勻分散性，并沒有以正交性與代表性為基礎(chǔ)，因此可能造成試驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定及導(dǎo)致分析誤差增大。

1.2 優(yōu)化方法

響應(yīng)面方法作為優(yōu)化的常用工具[38]，是研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)因素關(guān)系的方法，包括實(shí)驗(yàn)、建模、數(shù)據(jù)分析和最優(yōu)化過程。目前響應(yīng)面設(shè)計(jì)多與正交設(shè)計(jì)、均勻設(shè)計(jì)、星點(diǎn)設(shè)計(jì)、Doehlert設(shè)計(jì)、Box-Behnken 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等聯(lián)合應(yīng)用在方藥劑量配伍優(yōu)化方面的實(shí)驗(yàn)研究中。謝臻等[39]應(yīng)用Doehlert設(shè)計(jì)-渴求函數(shù)-響應(yīng)曲面優(yōu)化法，研究枳實(shí)、厚樸和芒硝的劑量配伍變化對(duì)大黃蒽醌類成分在大承氣湯中溶出的影響，結(jié)果顯示方中各味藥劑量配比為大黃-枳實(shí)-厚樸-芒硝1∶4∶2.31∶2時(shí)，蒽醌類成分有較好的溶出率。這是Doehlert數(shù)學(xué)模型運(yùn)用到中藥復(fù)方配伍研究的初步探討，為數(shù)學(xué)模型在中藥復(fù)方配伍的推廣和應(yīng)用提供理論依據(jù)。黃美艷等[40]應(yīng)用響應(yīng)曲面分析法對(duì)不同制法與配比的藥對(duì)當(dāng)歸-川芎的抗氧化活性作用進(jìn)行研究，結(jié)果表明先水提后醇提其清除自由基的活性最好。邱玲玲等[41]以流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性抑制率為指標(biāo)，采用Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)法預(yù)測雙黃連注射液組合成分的最佳配比。結(jié)果表明其最優(yōu)配比為綠原酸-隱綠原酸-咖啡酸-黃芩苷107∶279∶7.99∶92。黃美艷等[42]采用響應(yīng)面分析法對(duì)不同濃度當(dāng)歸-川芎藥對(duì)配伍養(yǎng)血補(bǔ)血效應(yīng)進(jìn)行研究，結(jié)果顯示當(dāng)歸與川芎的比例從4∶1到2∶1，從小劑量到大劑量，均表現(xiàn)為相加作用。而其他比例則表現(xiàn)出小劑量相加，大劑量協(xié)同的作用。陳海燕等[43]采用響應(yīng)面法對(duì)丹參葛根的最佳組合比例進(jìn)行了研究探討，結(jié)果顯示丹參葛根的最佳組合比例為6∶4。王睿等[44]采用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（ED）-非線性建模（NM）-多目標(biāo)優(yōu)化（MO）的三聯(lián)法，簡稱ED-NM-MO三聯(lián)法，對(duì)經(jīng)基線等比增減設(shè)計(jì)的丹參、三七不同配比的藥效學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行非線性擬合和多目標(biāo)優(yōu)化，從而實(shí)現(xiàn)方劑劑量配比的非線性多目標(biāo)優(yōu)化。結(jié)果表明，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?duì)藥效指標(biāo)的不同要求設(shè)定不同的權(quán)重，獲得各自藥物相應(yīng)的最優(yōu)比例。這種適合復(fù)方特點(diǎn)的優(yōu)化方法可用于多飲片多組分多成分復(fù)方藥物的劑量配比優(yōu)化。

此外，鑒于星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面優(yōu)化法有著操作簡單、試驗(yàn)精度高、實(shí)驗(yàn)次數(shù)少等優(yōu)點(diǎn)，其在工藝優(yōu)化提取[45-48]以及制劑、食品、生化等[49-56]方面都有著廣泛的應(yīng)用，在藥學(xué)領(lǐng)域有著較好的推廣應(yīng)用價(jià)值。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

數(shù)據(jù)處理是對(duì)數(shù)據(jù)的采集、存儲(chǔ)、檢索、加工、變換和傳輸。常用的數(shù)據(jù)處理方法有數(shù)據(jù)挖掘[57]、回歸分析[58]等。數(shù)據(jù)處理方法可以從大量的、雜亂無章的數(shù)據(jù)中抽取并推導(dǎo)出特定的有意義的數(shù)據(jù)。基于此功能，許多學(xué)者都將數(shù)據(jù)處理方法應(yīng)用于方藥劑量配伍優(yōu)化試驗(yàn)研究中。蔡文選等[59]應(yīng)用化學(xué)計(jì)量學(xué)分辨方法-交互移動(dòng)窗口因子分析法，對(duì)桂枝-茯苓配伍后揮發(fā)油成分中的共有成分、差異成分及各成分溶出率進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示少數(shù)組分配伍后溶出率顯著增加，但大部分溶出率明顯下降，甚至個(gè)別組分消失。這表明藥對(duì)配伍后會(huì)改變其劑量。李偉霞等[60]基于人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)法對(duì)當(dāng)歸-川芎藥對(duì)中主要效應(yīng)物質(zhì)含量與其整合效應(yīng)值進(jìn)行擬合和分析，結(jié)果表明當(dāng)歸-川芎藥對(duì)1.5∶1水提物的整體補(bǔ)血效應(yīng)最好，1∶1醇提物的總活血化瘀效應(yīng)最好，1.5∶1醇提物的總調(diào)經(jīng)止血效應(yīng)最好。蔣海強(qiáng)等[61]以鉤藤總堿和萊菔子總堿有效組分的降血壓效應(yīng)為研究對(duì)象，采用偏最小二乘回歸分析方法，探討鉤藤總堿和萊菔子總堿的最佳配比，結(jié)果顯示鉤藤總堿25 μg?g-1和萊菔子總堿30 μg?g-1時(shí)得到最佳配比。表明采用正交設(shè)計(jì)結(jié)合偏最小二乘回歸分析的方法，能夠消除各因素的交互作用，可用于中藥的組分配伍及優(yōu)化設(shè)計(jì)。施旭光等[62]采用非線性回歸法分析不同劑量配伍所導(dǎo)致的烏頭湯化學(xué)成分變化的內(nèi)涵。顯示不同劑量配伍的烏頭湯各藥味間主要存在非線性的關(guān)系，各因素間存在交互效應(yīng)，不同的優(yōu)化目標(biāo)有不同的最優(yōu)化配伍組合。商洪才等[63]應(yīng)用多目標(biāo)模糊優(yōu)化法對(duì)丹參、三七不同劑量配比組合治療實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血犬的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果觀察到丹參、三七在最優(yōu)配比10∶1和10∶3時(shí)可明顯改善模型犬的病變，同時(shí)，丹參、三七適宜的配比效果在整體調(diào)節(jié)功能上優(yōu)于2種藥的單獨(dú)應(yīng)用（10∶0，0∶10）。

雖然目前應(yīng)用數(shù)學(xué)方法對(duì)方藥劑量配伍優(yōu)化的研究越來越多，但是試驗(yàn)研究方法中還沒有能夠充分利用數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法的優(yōu)勢對(duì)中藥復(fù)方藥味組成與藥量配比優(yōu)化給予中肯的評(píng)價(jià)，同時(shí)數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法本身存在的不足也未能很好的揭示方劑配伍內(nèi)涵。因此，無論從試驗(yàn)方法上或是對(duì)數(shù)學(xué)方法本身都有待進(jìn)一步完善。

2 中藥配伍作用規(guī)律研究

中藥方劑并不是幾種或幾十種藥物的簡單堆砌，而是依據(jù)藥物各有所長的功用，在辨證、立法的基礎(chǔ)上選藥配伍而成并發(fā)揮整體增效減毒調(diào)節(jié)作用，使各具特性的群藥組合成一個(gè)新的有機(jī)整體。方劑經(jīng)過配伍必然使得復(fù)方成分變得更加復(fù)雜。為了更全面、深入地研究與數(shù)學(xué)特征相適應(yīng)的中藥復(fù)方配伍藥理作用和化學(xué)變化之間的相關(guān)規(guī)律，許多學(xué)者在研究復(fù)方配伍作用規(guī)律的實(shí)驗(yàn)中引入了數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法。

2.1 藥理作用變化規(guī)律研究

藥理實(shí)驗(yàn)是檢驗(yàn)藥物配伍藥效的途徑之一，其中中藥藥理包括整體、器官、細(xì)胞和分子4個(gè)水平。應(yīng)用藥理學(xué)的方法結(jié)合數(shù)學(xué)模型去探討中藥配伍的變化規(guī)律已有較多文獻(xiàn)報(bào)道。余林中等[64]通過運(yùn)用正交設(shè)計(jì)法對(duì)葛根芩連湯各配伍與解熱藥效之間的關(guān)系進(jìn)行研究以探討其配伍規(guī)律。結(jié)果顯示對(duì)于解熱指標(biāo)最佳的配伍是葛根黃芩。任均國等[65]構(gòu)建以中藥為節(jié)點(diǎn)，中藥配伍關(guān)系為邊的網(wǎng)絡(luò)理論，將網(wǎng)絡(luò)效能與不同配伍方劑的藥效進(jìn)行直線相關(guān)分析，采用急性心肌缺血再灌注損傷大鼠模型研究加味生脈散中兩兩藥物配伍規(guī)律，結(jié)果優(yōu)化出藥效最強(qiáng)、藥味數(shù)最佳的方劑為4味方最高的是人參+麥冬+丹參+延胡索，三味方最高的是人參+丹參+延胡索。馬秉亮等[66]應(yīng)用正交設(shè)計(jì)法對(duì)瀉心湯不同配伍抗炎作用進(jìn)行研究，結(jié)果顯示在抗炎方面，大黃是方中的第一要藥，黃芩次之，且兩者有協(xié)同作用，而黃連沒有明顯作用和影響。萬海同等[67]通過由麻黃、桂枝、杏仁和甘草組成的麻黃湯對(duì)16種誘導(dǎo)的SD大鼠，出汗，緩解痙攣的豚鼠氣管平滑肌，減輕疼痛與ICR小鼠動(dòng)物模型組和正常對(duì)照組進(jìn)行比較。基于結(jié)構(gòu)方程模型，對(duì)中草藥的路徑圖的繪制，用阿摩司（Amos）軟件和4個(gè)中藥和治療效果的關(guān)系進(jìn)行了測定，分析了結(jié)構(gòu)方程模型的相關(guān)關(guān)系。根據(jù)測量的標(biāo)準(zhǔn)通徑系數(shù)結(jié)果確定了麻黃湯中的君藥為麻黃，臣藥為桂枝，佐藥為杏仁，使藥為甘草。說明結(jié)構(gòu)方程模型可從一個(gè)全新的角度用于定量分析中藥復(fù)方方劑組成原理。

以中醫(yī)藥傳統(tǒng)理論為基點(diǎn)，將數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法理論與技術(shù)結(jié)合藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)方劑配伍規(guī)律進(jìn)行研究，通過對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析與綜合評(píng)價(jià)，探討復(fù)方中藥味配伍與藥理效應(yīng)變化的相關(guān)性規(guī)律，有助于對(duì)方劑配伍規(guī)律進(jìn)入更深層次的研究。

2.2 化學(xué)成分變化規(guī)律研究

中藥數(shù)學(xué)模型的研究對(duì)象除了中藥藥理，還包括中藥化學(xué)。方劑中各藥味具有多部位、多組分、多成分的特征，是一種特殊的化學(xué)混合體，中藥的配伍使化學(xué)成分變得更加復(fù)雜。如何全面揭示復(fù)方中藥化學(xué)在全方、有效部位、有效組分和有效成分4個(gè)層次上的配伍規(guī)律是目前需要解決的問題，許多學(xué)者利用數(shù)學(xué)方法對(duì)此難題進(jìn)行了較多的研究。李姝臻等[68]采用均勻設(shè)計(jì)法對(duì)黃芪桂枝五物湯中黃芪、桂枝、大棗、生姜與白芍不同劑量配比中白芍總苷含量變化進(jìn)行比較，結(jié)果表明復(fù)方配伍使白芍中白芍總苷的含量下降24.5%，生姜對(duì)其影響最大，占10.2% 。徐培平等[69]采用均勻設(shè)計(jì)-偏最小二乘回歸建模的方法，以小承氣湯和厚樸大黃湯配伍組分為研究實(shí)例，分析了復(fù)方藥物配伍規(guī)律和組方中各組分的相對(duì)關(guān)系。結(jié)果表明小承氣湯和厚樸大黃湯雖然都由大黃、厚樸、枳實(shí)三味藥組成，但兩方的藥味配伍比例不同，小承氣湯中大黃和厚樸效應(yīng)最大，而厚樸大黃湯以厚樸為君，大黃、枳實(shí)為臣使。陶靜等[70]應(yīng)用數(shù)據(jù)挖掘算法的頻繁模式增長（FP-Growth）方法分析四物湯類方和藥對(duì)、藥組內(nèi)部的組成關(guān)系，探討四物湯的配伍規(guī)律。結(jié)果顯示獲得大于0.15置信度的四物湯配伍常用藥有甘草、人參、肉桂和茯苓。王偉光等[71]采用正交設(shè)計(jì)法結(jié)合高效液相色譜對(duì)麻杏甘石湯不同配伍煎液主要化學(xué)成分含量進(jìn)行分析研究，并探討配伍對(duì)各化學(xué)成分含量的影響。結(jié)果顯示麻黃堿、偽麻黃堿及苦杏仁苷的含量于全方去甘草組中含量顯著降低，甘草次酸的含量于全方去杏仁組中也顯著下降，其余各組含量變化不顯著。周文俊等[72]應(yīng)用偏最小二乘法對(duì)麻丸仁的2種劑型進(jìn)行化學(xué)成分變化比較研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種劑型之間有差別的化學(xué)成分，最重要的主要來自枳實(shí)。還有部分學(xué)者利用主成分分析法和正交偏最小二乘判別法分析中藥藥對(duì)和方劑合煎液與分煎液中化學(xué)成分的差別，結(jié)果發(fā)現(xiàn)配伍合煎后化學(xué)成分的變化較大，應(yīng)該是導(dǎo)致中藥減毒增效原因[73-75]。

中藥復(fù)方雖然療效確切但組分成分相當(dāng)復(fù)雜，借助于數(shù)學(xué)方法對(duì)方藥配伍規(guī)律中化學(xué)成分的變化進(jìn)行試驗(yàn)研究不僅為復(fù)雜的配伍系統(tǒng)研究提供了有力的方法支持，同時(shí)也對(duì)方藥配伍規(guī)律內(nèi)涵的揭示有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。

3 中藥配伍禁忌研究

中藥理論中的“十八反十九畏”是目前中醫(yī)藥界共同認(rèn)可的配伍禁忌之一。雖然歷代醫(yī)藥學(xué)家多遵信十八反十九畏作為配伍禁忌，但亦有醫(yī)藥學(xué)家認(rèn)為相反藥同用，能相反相成，倘若運(yùn)用得當(dāng)，可產(chǎn)生較強(qiáng)的功效。近年來許多學(xué)者對(duì)十八反藥對(duì)配伍進(jìn)行了較多實(shí)驗(yàn)研究，尤其是結(jié)合了現(xiàn)代數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法，觀察逐漸深入，對(duì)十八反配伍規(guī)律的認(rèn)識(shí)也趨于客觀、準(zhǔn)確。盧丹丹等[76]用定量藥理學(xué)方法評(píng)價(jià)甘遂與甘草不同比例組合對(duì)腸運(yùn)動(dòng)的影響，采用均勻設(shè)計(jì)法以小鼠腸推進(jìn)率和腸質(zhì)量為指標(biāo)，觀察合并液和合煎液對(duì)腸功能的影響。結(jié)果表明：合并液可促進(jìn)腸推進(jìn)率，存在協(xié)同作用，兩藥合用大大增加腸推進(jìn)功能。該研究為甘遂-甘草反藥組合的毒效表征奠定了一定的研究基礎(chǔ)。由此可看出，應(yīng)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法在一定程度上可以闡釋中藥十八反藥物毒效與配比及劑量的關(guān)系。劉春芳等[77]分別以制川烏與生半夏的藥理作用為觀察指標(biāo)，采用均勻設(shè)計(jì)法對(duì)制川烏與生半夏的配伍藥效進(jìn)行研究。結(jié)果表明制川烏與生半夏配伍比例為10∶1時(shí)，拮抗作用接近最大，能降低制川烏的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。制川烏與生半夏為1∶1時(shí)合煎液對(duì)氣管酚紅分泌量的增加作用最明顯，能增強(qiáng)生半夏的祛痰作用，且其作用強(qiáng)度隨配比和劑量的不同而改變。王艷麗等[78]采用均勻設(shè)計(jì)法結(jié)合動(dòng)物急性毒性實(shí)驗(yàn)，探討藜蘆與細(xì)辛配伍的毒性規(guī)律。結(jié)果發(fā)現(xiàn)配伍后毒性并未隨藜蘆用量的增加呈嚴(yán)格的上升趨勢，毒性由藜蘆和細(xì)辛共同作用，且藜蘆對(duì)毒性的貢獻(xiàn)權(quán)重更大。當(dāng)藜蘆用量是細(xì)辛用量3～6倍時(shí)，毒性明顯。當(dāng)藜蘆給藥劑量低于臨床安全最高限時(shí)，藜蘆與細(xì)辛合用可視為安全的。當(dāng)藜蘆與細(xì)辛合煎，藜蘆用量為5 g?kg-1時(shí)所產(chǎn)生的毒性大致與藜蘆單煎所產(chǎn)生的毒性一致。表明藜蘆和細(xì)辛配伍后毒性大小取決于兩者的比例和各自用量大小。朱冠秀等[79]采用均勻設(shè)計(jì)法對(duì)南沙參、北沙參與藜蘆不同比例配伍是否都產(chǎn)生相反毒性作用進(jìn)行了研究，并考察了煎煮因素與毒性是否相關(guān)。結(jié)果顯示南沙參、北沙參與藜蘆配伍共同煎煮會(huì)使毒性增強(qiáng)，存在配伍相反的可能性。且在藜蘆給藥劑量相同的情況下，南、北沙參合并液毒性明顯低于合煎組，提示共同煎煮過程是影響配伍毒性的重要因素。這為南、北沙參反藜蘆之說提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

此外，還有許多學(xué)者[80-85]在這方面進(jìn)行了相關(guān)的研究，對(duì)中藥十八反配伍藥效的變化及配伍禁忌的組成特點(diǎn)進(jìn)行了探討，為相關(guān)的研究打下了一定的理論基礎(chǔ)。但同樣作為配伍禁忌的十九畏，雖然現(xiàn)代對(duì)其進(jìn)行了較多較深入的研究，取得了不少成果，但應(yīng)用數(shù)學(xué)方法對(duì)十九畏配伍特點(diǎn)進(jìn)行研究的報(bào)道幾乎沒有。總的來說，目前應(yīng)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法對(duì)中藥十八反十九畏的配伍特點(diǎn)進(jìn)行的研究還處于初期階段，揭示十八反十九畏藥對(duì)配伍規(guī)律的內(nèi)涵還有待進(jìn)一步的深入研究。

4 基于臨床處方配伍規(guī)律的研究

中藥方劑配伍研究的內(nèi)容還包括基于臨床處方配伍規(guī)律的挖掘。通過將數(shù)學(xué)方法應(yīng)用于臨床處方分析中，挖掘處方用藥的配伍規(guī)律，從而更好的指導(dǎo)臨床用藥。宋觀禮等[86]應(yīng)用頻數(shù)分析、復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)分析、點(diǎn)式互分析等方法對(duì)中醫(yī)診斷冠心病發(fā)病規(guī)律、癥狀規(guī)律、辨析規(guī)律、治法用藥規(guī)律進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘分析。其中對(duì)于冠心病治法用藥規(guī)律的研究結(jié)果顯示，臨床治療冠心病的核心處方用藥為黃芪、黨參、丹參、當(dāng)歸、川芎、茯苓、赤芍、瓜蔞、法半夏、麥冬、桃仁、紅花、陳皮、甘草。其中，桃仁-紅花的互信息積分最大（67.996 99），遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他2個(gè)藥物間的互信息積分，是目前治療冠心病最常用的藥對(duì)。妮等[87]應(yīng)用復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)分析對(duì)李發(fā)枝教授治療艾滋病帶狀皰疹及其后遺神經(jīng)痛的用藥規(guī)律進(jìn)行研究，結(jié)果顯示治療艾滋病帶狀皰疹及其后遺神經(jīng)痛的核心藥物為黃芩、甘草、紅花、車前子、全瓜蔞、當(dāng)歸、龍膽草。核心處方為龍膽瀉肝湯加減和瓜蔞紅花甘草湯加減。杜斌等[88]基于數(shù)據(jù)挖掘方法對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎方劑用藥及配伍規(guī)律進(jìn)行分析研究，結(jié)果顯示方中白術(shù)、茯苓藥對(duì)應(yīng)用的頻率最高，頻數(shù)112次。而甘草、白術(shù)、黃連、茯苓、白芍、木香、黨參、當(dāng)歸、黃芪、陳皮是出現(xiàn)頻率最高的10味藥。這些研究工作不但對(duì)深入探討臨床用藥配伍規(guī)律及指導(dǎo)臨床用藥有重要的實(shí)用意義，且對(duì)于解放依賴傳統(tǒng)中醫(yī)主觀性較強(qiáng)的辨證論治和經(jīng)驗(yàn)水平的思維模式有著重要的指導(dǎo)意義。

5 小結(jié)與展望

中藥方劑多組分、多成分、多藥效的特點(diǎn)使得中藥復(fù)方配伍成為一個(gè)復(fù)雜的組方系統(tǒng)。從方藥配伍的劑量優(yōu)化、中藥復(fù)方配伍的藥理效應(yīng)、化學(xué)成分變化以及中藥配伍禁忌這幾方面進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究與探討，有助于對(duì)中藥復(fù)方進(jìn)行更好的優(yōu)化篩選和對(duì)組方藥物整體療效進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，而且也在一定程度上體現(xiàn)了傳統(tǒng)中醫(yī)藥整體觀與系統(tǒng)論的思維模式。近年來，隨著各學(xué)科間的相互滲透相互影響，以及中醫(yī)藥走向現(xiàn)代化國際化的進(jìn)程中，要求用精確的方式及準(zhǔn)確的語言表達(dá)和描述中醫(yī)藥學(xué)，尤其對(duì)于如何全面、客觀、準(zhǔn)確地揭示中藥復(fù)方的配伍規(guī)律顯得更為重要。如何找到更好的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法和更好的數(shù)學(xué)擬合模型，如何更好的挖掘和發(fā)現(xiàn)復(fù)方中蘊(yùn)含的豐富的配伍規(guī)律內(nèi)涵，是值得深入探討研究的課題。

數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法和計(jì)算機(jī)信息技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，是現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)迅速發(fā)展以及中藥事業(yè)自身發(fā)展的需要。數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法通過對(duì)數(shù)據(jù)資料的搜集、整理、分析和推斷，探討設(shè)計(jì)試驗(yàn)研究從而掌握事物內(nèi)在客觀規(guī)律，具有數(shù)學(xué)化、定量化且準(zhǔn)確簡捷的特點(diǎn)。將數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用于中藥方劑配伍規(guī)律研究中，不僅可以將中藥方劑配伍定性與定量結(jié)合起來，用數(shù)學(xué)語言定性定量分析中藥復(fù)方配伍的相互作用規(guī)律，而且能夠做到客觀準(zhǔn)確，更有利于藥物之間的優(yōu)化篩選和進(jìn)行藥效的評(píng)價(jià)。然而，數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法在中藥方劑配伍規(guī)律的應(yīng)用研究仍處于初始階段，一方面，中藥復(fù)方配伍在宏觀上涉及藥味的組合、劑量大小的變化以及藥物間的相互作用，微觀上牽涉到各化學(xué)成分的相互作用可能發(fā)生物理化學(xué)反應(yīng)從而導(dǎo)致組分的改變，使得方劑配伍在多個(gè)環(huán)節(jié)上變得更復(fù)雜，這給全面準(zhǔn)確地揭示方劑配伍規(guī)律的工作帶來了更高的難度。另一方面，相對(duì)而言，雖然數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法能更好的輔助研究中藥方劑配伍規(guī)律，但目前的數(shù)學(xué)方法都在一定程度上存在著不足之處：首先，無論是方法上還是設(shè)計(jì)上都未能更好更完善的彰顯出數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法的優(yōu)勢從而導(dǎo)致無法更全面準(zhǔn)確的揭示方劑配伍規(guī)律的內(nèi)涵。比如析因設(shè)計(jì)法在因素增加的情況下，不但計(jì)算復(fù)雜而且難以解釋眾多的交互作用；正交設(shè)計(jì)法在多水平多因素的情況下試驗(yàn)次數(shù)較多，工作量亦大；均勻設(shè)計(jì)法須回歸出與實(shí)際相符的定量方程式進(jìn)行數(shù)據(jù)處理；響應(yīng)面設(shè)計(jì)法得到的回歸方程要求自變量必須是連續(xù)的而且需要被試驗(yàn)者自由控制；數(shù)據(jù)挖掘法要求試驗(yàn)者能深刻理解其所應(yīng)用的領(lǐng)域，以便正確選擇合適的模式進(jìn)行試驗(yàn)；模糊數(shù)學(xué)方法的設(shè)計(jì)更多的是依靠試驗(yàn)者或?qū)I(yè)人員的經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)，當(dāng)缺乏這樣的經(jīng)驗(yàn)與知識(shí)時(shí)，很難獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；偏最小二乘回歸方法的解釋矩陣中含有大量與響應(yīng)向量無關(guān)的信息，可影響整個(gè)回歸的效果；等等；其次，只是簡單地套用數(shù)理方法和數(shù)學(xué)模型，還沒有能夠充分吸收和利用數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法的理論成果和科技發(fā)展技術(shù)對(duì)中藥復(fù)方的劑量配伍優(yōu)化給予全面、客觀、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)的試驗(yàn)研究方法，沒有針對(duì)具體情況作改進(jìn)，以適用于不同中藥復(fù)方配伍規(guī)律的研究。此外，將數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用于臨床的研究較少[89-90]，為了深入地闡明臨床用藥機(jī)制以及更好的為臨床醫(yī)師根據(jù)病理診斷提供用藥參考，在數(shù)學(xué)方法的基礎(chǔ)上結(jié)合臨床特點(diǎn)進(jìn)行深層次的研究還需要做出更大的努力。因此，在未來的方劑配伍研究發(fā)展中，如何以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，同時(shí)引入數(shù)學(xué)模型，在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上突破傳統(tǒng)思維進(jìn)行技術(shù)改進(jìn)和方法創(chuàng)新，是當(dāng)前建立客觀科學(xué)技術(shù)研究中藥方劑配伍規(guī)律的關(guān)鍵。

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篇（4）

2、定量研究法：運(yùn)用自然科學(xué)知識(shí)，把握管理活動(dòng)與管理現(xiàn)象內(nèi)在的數(shù)量關(guān)系，尋求其數(shù)量規(guī)律的方法。

3、歷史研究法：對(duì)前人的管理實(shí)踐、管理思想和管理理論予以總結(jié)概括，從中找出帶有規(guī)律性的東西，實(shí)現(xiàn)古為今用的方法。

篇（5）

【中圖分類號(hào)】 G424 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】 1006-5962（2013）02（b）-0042-01

1 數(shù)學(xué)公理化方法概述

1.1 數(shù)學(xué)公理化方法的內(nèi)涵

純形式公理化方法的特征是具有高度的形式化和抽象化，系統(tǒng)的基本概念、基本關(guān)系用抽象的符號(hào)表示，命題由符號(hào)組成的公式表示，命題的證明用一個(gè)公式串表達(dá)。一個(gè)符號(hào)化的形式系統(tǒng)只有在解釋之后才有意義。同時(shí)，作為一個(gè)符號(hào)化的形式系統(tǒng)，可以用來提供簡潔精確的形式化語言；提供數(shù)量分析及計(jì)算的方法；提供邏輯推理的工具。

公理化方法的具體形態(tài)有三種：實(shí)體性公理化方法、形式公理化方法和純形式公理化方法，用它們建構(gòu)起來的理論體系分別為《幾何原本》、《幾何基礎(chǔ)》和ZFC公理系統(tǒng)。

1.2 公理化方法的基本思想

數(shù)學(xué)是撇開現(xiàn)實(shí)世界的具體內(nèi)容來研究其量性特征形式與關(guān)系的。其結(jié)果只有經(jīng)過證明才可信，而數(shù)學(xué)證明采用的是邏輯推理方法，根據(jù)邏輯推理的規(guī)則，每步推理都要有個(gè)大前提，我們不難想象到，最初的那個(gè)大前提是不可能再由另外的大前提導(dǎo)出的，既是說，我們的逆推過程總有個(gè)“盡頭”，同樣，概念需要定義，新概念由前此概念定義，必也出現(xiàn)這樣的情況最原始的概念無法定義。

因此，我們要想建立一門科學(xué)的嚴(yán)格的理論體系，只能采取如下方法：讓該門學(xué)科的某些概念以及與之有關(guān)的某些關(guān)系作為不加定義的原始概念與公設(shè)或公理，而以后的全部概念及其性質(zhì)要求均由原始概念與公設(shè)或公理經(jīng)過精確定義與邏輯推理的方法演繹出來，這種從盡可能少的一組原始概念和公設(shè)或公理出發(fā)，運(yùn)用邏輯推理原則，建立科學(xué)體系的方法叫做公理化方法。

2 數(shù)學(xué)公理化方法的邏輯特征

2.1 協(xié)調(diào)性

無矛盾性要求在一個(gè)公理系統(tǒng)中，公理之間不能自相矛盾，由公理系推出的結(jié)果也不能矛盾，即不能同時(shí)推出命題A與其否定命題，顯然，這是對(duì)公理系統(tǒng)的最基本的要求。如何證明給定的公理系統(tǒng)的無矛盾性呢？若想通過“由這一公理系作出全部可能的推論并指出其中沒有矛盾”來證明是不可能的。

2.2 獨(dú)立性

獨(dú)立性要求在一個(gè)公理系統(tǒng)中，被選定的公理組中任何一個(gè)公理都不能由其他公理推出。獨(dú)立性其實(shí)要求的是公理組中公理之間不能有依從關(guān)系，若某一公理被其余公理推出，那它實(shí)質(zhì)上就是一個(gè)定理，在公理組中就是多余的，所以，獨(dú)立性要求公理組中公理數(shù)目最少。

2.3 完備性

完備性要求在一個(gè)公理系統(tǒng)中，公理組的選取能保證由公理組推出該系統(tǒng)的全部真命題，所以，公理不能過少，否則就推不出某些真命題，這是關(guān)于完備性的古典定義。現(xiàn)代數(shù)學(xué)常借助模型的同構(gòu)給公理系的完備性下定義，即如果公理系T的所有模型或解釋都彼此同構(gòu)，就稱這個(gè)公理系是完備的。

在上述公理化方法的三個(gè)特征中，無矛盾性是最重要而又是非有不可的。獨(dú)立性從理論上講，從完美簡煉上講，應(yīng)該要求，因?yàn)楣砗投ɡ碓谡麄€(gè)系統(tǒng)中處的地位不同，公理是出發(fā)點(diǎn)，定理是推出的，不能混在一塊。但是，獨(dú)立性要求有時(shí)可降低。現(xiàn)行中學(xué)幾何體系就放棄了這一要求。至于完備性，要求就大大放寬了；而且“從研究完備的公理系確定的對(duì)象轉(zhuǎn)向研究其公理系不完備的對(duì)象”被認(rèn)為是現(xiàn)代數(shù)學(xué)的特征之一。

3 數(shù)學(xué)公理化方法在研究數(shù)學(xué)中的作用和意義

3.1 表述和總結(jié)科學(xué)理論

公理化方法使有關(guān)的理論系統(tǒng)化，把它們按照某種邏輯順序構(gòu)建成一個(gè)系統(tǒng)，因而便于人們系統(tǒng)地理解知識(shí)體系，便于掌握理論的本質(zhì)。它是應(yīng)用演繹推理的基本方法，它為認(rèn)識(shí)世界提供了演繹推理的模式，提供了一種理性證明的手段，它是表述科學(xué)理論一種比較完善的方法，它為各門科學(xué)提供了一種思想方法上的示范和有效的表述手段，有利于促進(jìn)理論的完善和嚴(yán)格化。它賦與數(shù)學(xué)內(nèi)在的統(tǒng)一性，有助于人們了解數(shù)學(xué)各分支、各部門之間的本質(zhì)聯(lián)系。

3.2 完善和創(chuàng)新理論

公理化方法的應(yīng)用要求一門科學(xué)的充分成熟：積累了一定數(shù)量的基礎(chǔ)知識(shí)，進(jìn)行了一定的系統(tǒng)分析和研究，對(duì)該門學(xué)科知識(shí)結(jié)構(gòu)有了較深入的理解。因此，實(shí)現(xiàn)公理化的過程也是深入研究理論體系的過程。采用公理化方法還可以發(fā)現(xiàn)和補(bǔ)充理論系統(tǒng)中的缺陷和漏洞。從而有利于完善已有理論，創(chuàng)建新的理論。

3.3 培養(yǎng)和熏陶人們的邏輯思維能力

數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)，重要的不在于只是記住概念、公式、定理和法則，而在于學(xué)會(huì)如何去獲得這些知識(shí)，即學(xué)會(huì)正確地進(jìn)行數(shù)學(xué)思維，邏輯思維正是數(shù)學(xué)思維的核心成分之一。邏輯思維能力是一種重要的數(shù)學(xué)能力。而公理化方法使邏輯思維在數(shù)學(xué)中的作用得以充分發(fā)揮，大大提高了數(shù)學(xué)教育的成效，實(shí)現(xiàn)高度的思維經(jīng)濟(jì)，這無疑對(duì)培養(yǎng)和熏陶學(xué)生的邏輯思維能力有其十分重要的作用和意義。此外，由于公理化方法可以揭示一個(gè)數(shù)學(xué)系統(tǒng)和分支的內(nèi)在規(guī)律性，從而使它系統(tǒng)化，這也無疑有利于人們學(xué)習(xí)和掌握。

4 結(jié)語

公理化方法是是建立某些抽象學(xué)科的基礎(chǔ)，是加工、整理知識(shí)，建立科學(xué)理論的工具，公理系統(tǒng)的形成是數(shù)學(xué)分支發(fā)展的新起點(diǎn)。公理化方法有助于發(fā)現(xiàn)新的數(shù)學(xué)成果，可以探索各個(gè)數(shù)學(xué)分支的邏輯結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)新問題，促進(jìn)和推動(dòng)新理論的創(chuàng)立和發(fā)展。對(duì)各門自然科學(xué)的表述具有積極的借鑒作用。同時(shí)公理化方法對(duì)于學(xué)生理解和掌握數(shù)學(xué)知識(shí)、數(shù)學(xué)方法及培養(yǎng)學(xué)生邏輯思維能力具有重要作用。公理化方法本身及其在數(shù)學(xué)理論和實(shí)踐應(yīng)用中的巨大作用，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展還在繼續(xù)向前發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

篇（6）

 

科學(xué)史上許多偉大的科學(xué)理論的建立都與理想（思想）實(shí)驗(yàn)和理想模型有關(guān)。建立這些理論的科學(xué)家都是一代巨人，他們所取得的科學(xué)成就無疑是劃時(shí)代的，但從科學(xué)哲學(xué)的角度來看，更重要的是他們?nèi)〉贸删偷倪^程中所用的思維方法。因?yàn)樵谝话闱闆r下，結(jié)論總不免受到時(shí)代條件的局限，但正確的方法卻能給人們提供獨(dú)立探索的合理途徑。正如恩格斯所說：在一切哲學(xué)家那里，體系都是暫時(shí)的東西，但包括在體系中的真正有價(jià)值的方法都可以長久地啟人心智、發(fā)人深思。思維方法又是一切方法手段的靈魂。筆者試圖通過展示大師們設(shè)計(jì)理想實(shí)驗(yàn)和創(chuàng)立理想模型的過程來揭示他們所用的思維方法——理想化思維方法，以期為科技工作者提供一種探索問題的方法。

一．理想實(shí)驗(yàn)和理想模型

1.理想實(shí)驗(yàn)

作為力學(xué)基礎(chǔ)的慣性定律，不是從實(shí)驗(yàn)中得出的，而是從理論實(shí)驗(yàn)中得出的一個(gè)科學(xué)定律。伽利略曾經(jīng)注意到：當(dāng)一個(gè)球從一個(gè)斜面上滾下又滾上第二個(gè)斜面時(shí)，球在第二個(gè)斜面上所達(dá)到的高度同在第一個(gè)斜面上所達(dá)到的高度近似相等。他斷定這一微小差異是由于摩擦的結(jié)果，如果將摩擦取消，那么第二次的高度完全等于第一次的高度。他又推想，在完全沒有摩擦的情況下，不管第二個(gè)斜面的傾斜度多么小，它在第二個(gè)斜面上總要達(dá)到相同的高度。如果第二個(gè)斜面的斜度完全取消，那么球從第一個(gè)斜面滾下來之后，將以恒速在無限長的平面上永遠(yuǎn)不停地運(yùn)動(dòng)下去。當(dāng)然，這個(gè)實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)理想實(shí)驗(yàn)，無法真正地操作這個(gè)實(shí)驗(yàn)，因?yàn)橛肋h(yuǎn)也無法把摩擦力消除盡，也無法找到和制作一個(gè)無限長的平面。伽利略是理想實(shí)驗(yàn)的先驅(qū)，后來牛頓把伽利略的慣性原理確立為動(dòng)力學(xué)的第一定律——慣性定律。論文修改。

牛頓繼承了伽利略的傳統(tǒng)，在思索萬有引力問題時(shí)也設(shè)計(jì)了一個(gè)著名的思想實(shí)驗(yàn)——拋體運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)。一塊石頭投出，由于自身重量的壓力，被迫離開直線路徑，如果單有初始投擲，理應(yīng)按直線運(yùn)動(dòng)，而這時(shí)卻在空氣中描出了曲線，最終落在地面，投擲的速度越大，它落地前走得越遠(yuǎn)。于是，我們可以假設(shè)當(dāng)速度增到如此之大，在落地前描出1、2、5、100、1000英里長的弧線，直到最后超出了地球的限度，進(jìn)入空間永不觸及地球。這個(gè)實(shí)驗(yàn)在當(dāng)時(shí)的物質(zhì)條件下是無論如何不能實(shí)現(xiàn)的。牛頓在真實(shí)的拋體運(yùn)動(dòng)的基礎(chǔ)上，發(fā)揮思維的力量把拋體的速度推到地球引力范圍之外。

愛因斯坦是20世紀(jì)理想實(shí)驗(yàn)的卓越大師。愛因斯坦的俠義相對(duì)論源于追光理想實(shí)驗(yàn)。愛因斯坦創(chuàng)建廣義相對(duì)論的突破口——等效原理亦源于理想實(shí)驗(yàn)。

理想實(shí)驗(yàn)雖然也稱實(shí)驗(yàn)，但它與真實(shí)的可操作的科學(xué)實(shí)驗(yàn)是有區(qū)別的。可操作性的科學(xué)實(shí)驗(yàn)是實(shí)踐活動(dòng)的一種形式，是人們通過物化過程而進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)；而理想實(shí)驗(yàn)是一種思維活動(dòng)，是人們在創(chuàng)造性思維活動(dòng)中設(shè)想出來的，是現(xiàn)實(shí)中無條件物化的實(shí)驗(yàn)。理想實(shí)驗(yàn)并不是脫離實(shí)際的主觀臆想，而是有其客觀基礎(chǔ)的。理論實(shí)驗(yàn)是以實(shí)踐為基礎(chǔ)的，它是在真實(shí)的科學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，抓住主要矛盾，忽略次要矛盾，對(duì)客觀對(duì)象的實(shí)際過程進(jìn)行更深本質(zhì)的探究。

2.理想模型

理想模型是為了便于研究問題而建立起來的一種高度抽象的理想對(duì)象。它有三個(gè)特點(diǎn)：一是理想模型的建立必須有真實(shí)實(shí)驗(yàn)或客觀事實(shí)作基礎(chǔ)。二是理想模型既是模型又是概念，是科學(xué)抽象的產(chǎn)物，反應(yīng)事物的本質(zhì)屬性。三是運(yùn)用思維把事物的某些屬性引至極限的結(jié)果。論文修改。

盧瑟福的原子有核模型是科學(xué)史上最著名的理想模型之一。1907年盧瑟福為了驗(yàn)證他導(dǎo)師的原子模型，建議研究生蓋革和馬斯登觀察鐳發(fā)射出的高度a粒子穿過薄的金屬箔片后的偏轉(zhuǎn)情況，結(jié)果出人意料。盧瑟福以a粒子實(shí)驗(yàn)為事實(shí)根據(jù)，發(fā)揮思維的力量建立起了類似太陽系結(jié)構(gòu)的原子有核模型，開創(chuàng)了原子能時(shí)代。論文修改。

原子有核模型建模過程：

（1）根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行推理

1）絕大多數(shù)a不偏轉(zhuǎn)，說明原子內(nèi)部絕大部分是空的。

2）少數(shù)a大角偏轉(zhuǎn)，說明原子核的存在。

3）極少數(shù)a被反彈，說明a粒子在原子中遇到比它本身質(zhì)量、電量大得多的物體并發(fā)生正碰

（2）提出新的原子結(jié)構(gòu)模型設(shè)想

在原子的中心有一個(gè)很小的核，叫原子核，原子的全部正電荷和幾乎全部質(zhì)量都集中在原子核里，帶負(fù)電的電子在核外空間繞核旋轉(zhuǎn)。

從以上這些里程碑式的科學(xué)史實(shí)中，我們可以感受到大師們跳動(dòng)著的思維脈搏——理想化思維方法。

二、理想化思維方法

理想化思維方法是思維主體運(yùn)用非邏輯思維方法和邏輯思維方法相結(jié)合的思維方法，抓住事物性質(zhì)的主要方面，剔除次要方面，塑造理想化實(shí)驗(yàn)過程、創(chuàng)造理想模型而從事科學(xué)創(chuàng)造的一種思維方法。

恩格斯在《自然辨證法》中，曾經(jīng)就卡諾研究蒸汽機(jī)的基本過程方法，對(duì)理想化思維方法進(jìn)行了精辟的分析。卡諾提出，在理想情況下，熱機(jī)循環(huán)是由兩個(gè)等溫過程和兩個(gè)絕熱過程組成的，這就撇開了工質(zhì)溫度的變化以及工質(zhì)和外界熱量交換等次要因素；又提出理想循環(huán)是可逆的，這就略去了摩擦等不可逆的因素；還提出理想循環(huán)式封閉的，從而忽略掉真實(shí)熱機(jī)工質(zhì)在循環(huán)末了被系統(tǒng)拋棄、使循環(huán)非封閉的情況。經(jīng)過這樣的簡化和純化，就以純粹的形態(tài)顯露出熱機(jī)的內(nèi)部過程。盡管這樣的理想循環(huán)是不可能真正實(shí)現(xiàn)的。恩格斯指出，卡諾“發(fā)現(xiàn)蒸汽機(jī)中的基本過程并不是以純粹的形式出現(xiàn)，而是被各種各樣的次要過程掩蓋住了；于是他撇開了這些對(duì)主要過程無關(guān)重要的次要情況而設(shè)計(jì)了一部理想的蒸汽機(jī)（或煤氣機(jī)），的確，這樣一部機(jī)器就像幾何學(xué)上的線和面一樣是絕不可能制造出來的，但是它按照自己的方式起了像這些數(shù)學(xué)抽象所起的同樣的作用：它表現(xiàn)純粹的、獨(dú)立的、真正的過程”。

理想化思維方法包括在“假象實(shí)驗(yàn)”、“理想實(shí)驗(yàn)”、“抽象實(shí)驗(yàn)”和理想模型的具體的理想化過程之中。

1、理想化思維方法的特點(diǎn)

（1）理想化思維方法的客觀性

理想化思維方法主要貫穿在理想實(shí)驗(yàn)和理想模型之中，理想模型和理想實(shí)驗(yàn)的客觀性決定了理想化思維方法的客觀性。

由科學(xué)抽象得到的理想模型，在現(xiàn)實(shí)世界中是找不到的東西，但不能說它是純粹思維的創(chuàng)造。理想模型是對(duì)客觀事物的一種近似的反映，它突出反映了客觀事物的某一主要矛盾或主要特征，完全忽略了其他方面的矛盾和特征，因而使物質(zhì)的規(guī)律具有比較簡化的形式，使人們易于認(rèn)識(shí)和掌握它們。

(2)理想化思維方法的邏輯性

它的推理過程，是以一定邏輯法則為根據(jù)的，而這些邏輯的'格'是在千百次實(shí)踐中形成的結(jié)局。理想化思維方法可以加深人們對(duì)真實(shí)實(shí)驗(yàn)的理解，克服具體實(shí)驗(yàn)的局限性，進(jìn)一步揭示出客觀現(xiàn)象和過程之間內(nèi)在的邏輯聯(lián)系。

(3)理想化思維方法的創(chuàng)造性

理想化思維方法的非邏輯思維活動(dòng)的廣度和深度，也是與實(shí)踐的廣度和深度、與創(chuàng)造性思維活動(dòng)的廣度和深度密切聯(lián)系在一起的。一個(gè)毫無物理知識(shí)、一個(gè)不從事物理方面科學(xué)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的人，是絕對(duì)不會(huì)進(jìn)行斜面思想實(shí)驗(yàn)的，也不會(huì)總結(jié)出慣性定律。

2.理想化思維方法在科學(xué)探究中的作用

(1)理想化思維方法是科學(xué)抽象的重要手段

現(xiàn)代科學(xué)積累了與日俱增的、數(shù)量龐大的經(jīng)驗(yàn)材料，如何從經(jīng)驗(yàn)層次的認(rèn)識(shí)上升為理論層次的認(rèn)識(shí)，是哲學(xué)家和科學(xué)家們十分關(guān)心的重大問題。理論建構(gòu)需要科學(xué)抽象，科學(xué)抽象是理性認(rèn)識(shí)的基本形式。科學(xué)抽象就是抽出和排除事物非本質(zhì)的次要因素，通過思維揭示其固有的本質(zhì)特征。在一般的實(shí)驗(yàn)研究中，不可能完全排除次要因素和外來干擾，而在理想化過程中，可以發(fā)揮理想化思維的力量，經(jīng)過高度抽象得到理想客體，把對(duì)象的主要矛盾或主要特征，以純粹的理想化形式呈現(xiàn)出來，從而深刻地揭示自然過程的客觀規(guī)律性。

(2)理想化思維方法有助于指導(dǎo)進(jìn)行理想實(shí)驗(yàn)，從而直覺地把握事物的本質(zhì)

事物具有質(zhì)的多樣性，事物的質(zhì)又具有隱蔽性。對(duì)于事物的本質(zhì)不可能一次就認(rèn)識(shí)清楚，當(dāng)認(rèn)識(shí)到事物的初級(jí)本質(zhì)之后，還有二級(jí)、三級(jí)本質(zhì)，因此，就需要進(jìn)行多次的反復(fù)的認(rèn)識(shí)。認(rèn)識(shí)事物的本質(zhì)可以運(yùn)用可操作性的觀察和實(shí)驗(yàn)，但是，比如認(rèn)識(shí)了萬有引力，無論怎么做操作性的觀察和實(shí)驗(yàn)，也無法得到物化的結(jié)果；又比如，無論做多少操作性的觀察和實(shí)驗(yàn)，也無法得到'時(shí)間是可疑的'物化結(jié)果。可是，理想化思維指導(dǎo)下的思想實(shí)驗(yàn)可以克服客觀條件限制所帶來的種種困難，可以超脫邏輯思維的束縛，可以充分發(fā)揮非邏輯思維能力，構(gòu)想理想化的精神客體，進(jìn)行意念性的操作思維，剝開種種現(xiàn)象的迷惑，直覺地把握事物更深層的本質(zhì)。

理想化思維方法在現(xiàn)代科學(xué)中顯示出突出的作用。但是，由于理想化思維方法所把握到的事物的本質(zhì)和公理，仍然是一種理性的認(rèn)識(shí)，它的真理性必須由實(shí)踐來驗(yàn)證，并由實(shí)踐來進(jìn)一步豐富和發(fā)展。

(3)理想化思維方法有助于建立理想模型，形成科學(xué)預(yù)見

理想化思維方法主要有兩種形式：理想實(shí)驗(yàn)（思想實(shí)驗(yàn)）和理想模型。建立理想模型有助于揭示事物的特殊本質(zhì)，形成科學(xué)預(yù)見。〖JP2〗例如，在固體物理學(xué)中，常把普通金屬當(dāng)作沒有'缺陷'的理想晶體來研究，科學(xué)家根據(jù)理想晶體的研究，作出預(yù)見，減少金屬結(jié)構(gòu)的'缺陷'，可大大提高金屬材料的強(qiáng)度。人們根據(jù)預(yù)見，用技術(shù)手段來減少金屬的'缺陷'，研究一些極細(xì)的金屬絲，其強(qiáng)度逐漸接近理想晶體的強(qiáng)度。又如，在數(shù)十年前，人們發(fā)現(xiàn)104號(hào)以上的元素都有極強(qiáng)的放射性，壽命極短 ，為了預(yù)測后面的元素的穩(wěn)定性，科學(xué)家們分析了已有元素的質(zhì)子數(shù)、中子數(shù)與穩(wěn)定性的關(guān)系，建立了一個(gè)類似立體地圖的理想模型，用該模型預(yù)測到114號(hào)元素將極其穩(wěn)定。1999年1月俄美聯(lián)合小組合成了114號(hào)元素，4月美國勞倫斯-柏克萊實(shí)驗(yàn)合成116、118號(hào)元素。

參考文獻(xiàn)：

【1】陳毓芳、鄒延肅，物理學(xué)史簡明教程，北京師范大學(xué)出版社，1986年7月第一版。

【2】【美】阿特·霍布森著，秦克誠、劉培森、周國榮譯，物理學(xué)基本概念及其與方方面面的關(guān)系，上海科學(xué)技術(shù)出版社，2001年7月。

篇（7）

2011年3月1日起施行的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)藥事管理規(guī)定》中規(guī)定，臨床藥學(xué)部門的出發(fā)點(diǎn)應(yīng)加強(qiáng)開展臨床藥學(xué)工作，開展以“患者為中心”，提高臨床疾病的藥物性治療方式。本著“合理用藥”為核心，全程參與臨床一線觀察及參與用藥，本文以1例真菌性肺炎患者為例，在其治療過程中對(duì)其用藥情況進(jìn)行監(jiān)護(hù)，對(duì)監(jiān)護(hù)實(shí)施過程與結(jié)局進(jìn)行歸納，總結(jié)藥師參與臨床治療的體會(huì)。

 

1.病例概況

 

患者，女，26歲，就診于新鄉(xiāng)精神病院，診斷為“精神分裂癥”，曾就診多家醫(yī)院，目前癥狀控制。2014年11月15日，因“股骨骨折”在我院行手術(shù)治療。患者因“咳嗽咳痰伴發(fā)熱1月余”入院。入院查體：體溫38.2℃，脈搏90次/min，神志不清，精神可。呼吸運(yùn)動(dòng)正常，肋間隙正常，語顫正常。雙側(cè)鎖骨中線叩診清音，呼吸規(guī)整，雙肺可聞及濕噦音，無胸膜摩擦音。降鈣素定量：0.85ng/mL;中性粒細(xì)胞百分比：85.6%;白細(xì)胞：11.3×109/L;血紅蛋白：92g/L;中性粒細(xì)胞絕對(duì)值：9.71×109/L;嗜酸細(xì)胞百分比：0.4%，偏高，考慮有肺部感染;人院診斷：(1)肺部感染(真菌性肺炎混合感染);(2)精神分裂癥;(3)肺結(jié)核。

 

2.主要治療過程和藥學(xué)監(jiān)護(hù)點(diǎn)

 

2.1患者主要治療過程

 

患者入院后給予抗感染，平喘、祛痰、抗結(jié)核等治療，在住院期間存在細(xì)菌、真菌混合性感染，持續(xù)發(fā)熱，感染控制過程比較復(fù)雜困難，先后給予阿莫西林克拉維酸鉀針、莫西沙星片、硫酸依替米星針、伏立康唑粉針、萬古霉素針、美洛培南針、伊曲康唑膠囊。抗感染及多索茶堿、氨溴索、氨基酸營養(yǎng)支持等對(duì)癥積極治療患者病情好轉(zhuǎn)后出院。主要治療藥物見表1。

 

2.2藥學(xué)監(jiān)護(hù)點(diǎn)

 

2.2.1抗菌藥物的藥學(xué)監(jiān)護(hù) 患者入呼吸內(nèi)科后血白細(xì)胞增高，持續(xù)高熱，在沒有細(xì)菌學(xué)依據(jù)前治療時(shí)選用B一內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合抗菌藥，聯(lián)用左氧氟沙星、硫酸依替米星抗菌藥物合用有增強(qiáng)抗感染協(xié)同作用，其治愈率高。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果與細(xì)菌學(xué)依據(jù)對(duì)抗菌藥物的選擇做出合理調(diào)整，將耐藥菌控制到最低限度，待患者病情相對(duì)穩(wěn)定后便將抗菌藥物改為降階梯治療。治療第3天，患者仍然咳嗽，痰量少，體溫最高達(dá)40℃，患者目前診斷明確，為混合感染。需覆蓋革蘭陰性菌及非典型病原體，且患者病情重，不能進(jìn)食，在營養(yǎng)支持治療的基礎(chǔ)上可加強(qiáng)抗感染治療，可更換抗菌抗感染藥物，臨床藥師建議將左氧氟沙星改為莫西沙星。理由如下：(1)莫西沙星是廣譜和具有抗菌活性的8-甲氧基氟喹諾酮類抗菌藥，在抗菌抗感染譜方面相對(duì)于左氧氟沙星的抗菌能力更好臨床應(yīng)用更廣。莫西沙星對(duì)厭氧菌同時(shí)具有較高的抗菌作用，可以不經(jīng)過細(xì)胞色素酶P450代謝，并且對(duì)其他藥物的代謝過程不受影響。(2)莫西沙星防耐藥變異濃度比左氧氟沙星低，選擇莫西沙星可縮小突變選擇窗。鹽酸莫西沙星片、阿莫西林克拉維酸鉀針、硫酸依替米星及伏立康唑針聯(lián)合用藥治療，觀察病情變化。病情改善后可進(jìn)行降階梯治療。第6天患者仍發(fā)燒，體溫39.2℃，患者右膝關(guān)節(jié)原手術(shù)部位出現(xiàn)一破口，有膿性分泌物流出，請(qǐng)骨科醫(yī)生會(huì)診，考慮右膝關(guān)節(jié)化膿性感染。建議：行膿性分泌物的細(xì)菌培養(yǎng)。根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果調(diào)整抗生素，臨床藥師根據(jù)經(jīng)驗(yàn)性治療肺炎來看，廣譜青霉素一內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合制劑在臨床應(yīng)用廣泛，碳青霉烯類抗生素通常為病情較重者的首選藥物，在依據(jù)患者的原學(xué)檢查結(jié)果酌情采用降階梯治療方案。肺炎的致病菌主要包括肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、銅綠假單胞菌等。陰性桿菌對(duì)常用抗生素往往具有多重耐藥性，其中耐藥率最小的是碳青霉烯抗生素。根據(jù)抗菌藥物PK/PD理論來看，碳青霉烯抗生素表現(xiàn)出時(shí)間依賴性的特征，抗菌療效一般在T>MIC超過給藥間隔的40%時(shí)比較良好。對(duì)提高美羅培南的療效，臨床可通過增大給藥劑量、延長輸注時(shí)間以及縮短給藥間隔三種途徑來實(shí)現(xiàn)。萬古霉素對(duì)革蘭陰性菌是無效的，主要用于腸球菌和耐藥金葡菌的感染，對(duì)各種革蘭陽性菌和桿菌均具有強(qiáng)大的抗菌活性。給予升級(jí)更換萬古霉素聯(lián)合美羅培南是合理的。治療當(dāng)天患者體溫有所下降，經(jīng)過12d抗菌藥物序貫治療，患者體溫、感染得到控制。

 

2.2.2抗真菌藥物的監(jiān)護(hù) 真菌性肺炎患者以咳嗽、咳痰、黏液絲狀痰、發(fā)燒為主要臨床表現(xiàn)，無特異性，同時(shí)也可伴有呼吸困難、胸疼、胸疼等癥狀。多數(shù)肺部有濕噦音，多數(shù)有中度發(fā)熱，以肺部為原發(fā)灶或并發(fā)肺部感染者最為常見，多發(fā)于免疫功能低下、器官功能障礙的患者，以念球菌和曲霉菌最為常見，在把握好真菌性肺炎的臨床特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，還應(yīng)綜合患者的臨床資料展開及時(shí)、有效的預(yù)防性治療、經(jīng)驗(yàn)性治療、明確感染后治療。念球菌首選氟康唑。亦可選用伊曲康唑、伏立康唑等。患者入院后咳嗽、咳痰、持續(xù)發(fā)熱，不排除真菌感染的可能，因此使用伊曲康唑膠囊抗真菌治療，治療3d后效果不佳，臨床藥師會(huì)診查閱相關(guān)資料，建議選用伏立康唑針。對(duì)于擬診侵襲性真菌感染的重癥患者，我國《重癥患者侵襲性真菌感染診斷與治療指南(2007)》指出，在這類患者的病原學(xué)結(jié)果沒有出來之前，可考慮采取經(jīng)驗(yàn)性真菌治療。面對(duì)不斷升高的抗菌藥物耐藥率，黃雋敏對(duì)COPO繼發(fā)肺部真菌感染患者57例的藥敏試驗(yàn)進(jìn)行了觀察分析，其中氟胞嘧啶和伊曲康唑的總耐藥率分別是19.3%和12.3%，兩性霉素B僅為0.2%，氟康唑耐藥最高，為26.3%。這可能與臨床使用較頻繁有關(guān)。兩性霉素B的劑量越大療效越好，但同時(shí)其毒性也會(huì)相應(yīng)增加，不良反應(yīng)嚴(yán)重，且個(gè)體差異明顯，因此治療劑量是個(gè)大問題。特別具有較嚴(yán)重的心臟和腎臟毒副作用，故目前使用較為限制。氟康唑雖對(duì)白色假絲酵母菌具有切確的效果，但由于抗菌譜并不寬，長期使用后耐藥率比較高，對(duì)大部分非白色假絲酵母菌、曲霉菌以及克柔假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌表現(xiàn)為無效，這在很大程度上是其應(yīng)用受限。而相對(duì)于氟康唑來說，伏立康唑是對(duì)其結(jié)構(gòu)的優(yōu)化，作用機(jī)制為由細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的14-a甾醇去甲基化，可對(duì)麥角甾醇的生物合成產(chǎn)生抑制作用，因此具有抗真菌的活性，不僅對(duì)曲霉菌、假絲酵母菌的抗菌活性比較良好，同時(shí)也還對(duì)克柔假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌具有一定的殺菌活性，這很好地彌補(bǔ)了氟康唑的不足，具有廣譜抗菌、耐藥率低、安全可靠的優(yōu)點(diǎn)。因此考慮選用伏立康唑粉針繼續(xù)治療，患者發(fā)熱癥狀有所改善。連續(xù)使用伏立康唑至第5天，患者痰培養(yǎng)結(jié)果顯示無真菌感染，這表明抗真菌治療理想，患者病情逐漸改善，仍序貫服用伊曲康唑膠囊，鑒于患者為混合感染，共治療12d，感染控制效果理想，癥狀顯著改善。

 

2.2.3藥物不良反應(yīng)的監(jiān)護(hù) 患者入院后使用多種藥物治療，抗菌藥物不良反應(yīng)監(jiān)護(hù)是重點(diǎn)，其中監(jiān)護(hù)的重點(diǎn)是抗菌藥物帶來的不良反應(yīng)，同時(shí)還更應(yīng)重點(diǎn)監(jiān)護(hù)各種藥物相互作用帶來的不良反應(yīng)，藥物不良反應(yīng)的監(jiān)護(hù)如下。

 

中樞神經(jīng)系統(tǒng)的監(jiān)護(hù)：臨床藥師考慮美羅培南在c.位側(cè)鏈導(dǎo)入二甲基氨基甲烯吡咯烷，雖然使得堿性降低，減弱了對(duì)腎及中樞的毒性，但是還是要對(duì)患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)的變化情況進(jìn)行緊密的觀察，注意患者有無發(fā)生頭痛、失眠、抽搐等癥狀。在本次監(jiān)護(hù)過程中，患者未發(fā)生以上不良反應(yīng)。

 

肝功能監(jiān)護(hù)：伊曲康唑主要通過影響肝臟細(xì)胞色素P450同工酶CYP3A的活性，引起藥物代謝性相互作用，進(jìn)而發(fā)生肝毒性。伊曲康唑引起的最常見的不良反應(yīng)有消化不良、腹痛、惡心、嘔吐等，部分患者出現(xiàn)肝酶增加、肝炎和膽汁淤積性黃疸，密切—監(jiān)測肝功能。

 

腎功能監(jiān)護(hù)：萬古霉素可引起腎功能損傷，應(yīng)密切關(guān)注尿素氮、肌酐、尿量等，有條件可進(jìn)行血藥濃度監(jiān)測。

 

篇（8）

[中圖分類號(hào)] R541.7+5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）32-0151-04

Dose study on atrial fibrillation patients’ warfarin use based on pharmacogenetics

FU Yongping1 ZHANG Ziyan2

1.Department of Cardiology， Affiliated Hospital of Shaoxing University， Shaoxing 312000， China； 2.Department of Hematology， Heze Hospital of Traditional Chinese Medicine in Shandong Province， Heze 274035， China

[Abstract] Objective To compare the strengths of warfarin based on pharmacogenetics or defined by clinical indicators. Methods Either from outpatient or inpatient department， 220 patients who needed anticoagulative treatment by warfarin were recruited. These cases were divided into two groups. Warfarin use method of one group was determined by pharmacogenetics， specifically， CYP2C9 and VKORC1 genotyping were carried out to ascertain and adjust use dosage by Polymerase chain reaction-restriction nuclease fragment length polymorphism（PCR-RFLP）. As for the other group， therapeutic regimen was defined by the stable and qualifying time， the frequency of drug adjustment， absolute difference between initial and eventual dose and the proportion of anticoagulant overdose. Additionally， the severity and incidence of hemorrhagic events were closely observed during half year’s following up. Results Compared with traditional warfarin use regimen defined by clinical indicators， the results obtained by pharmacogenetics， including the stable and qualifying time， the frequency of drug adjustment， absolute difference between initial and eventual dose， the proportion of anticoagulant overdose（1.8% compared to 16.4%）， and the incidence of severe hemorrhagic events were unanimously better and statistically difference （P

[Key words] Warfarin； Atrial fibrillation； CYP2C9； VKORC1

我國心房顫動(dòng)患者數(shù)接近1000萬，心房顫動(dòng)的主要危害是腦梗死，而腦梗死的致殘率高，使患者生活質(zhì)量嚴(yán)重下降，給患者及其家屬帶來巨大的精神負(fù)擔(dān)和經(jīng)濟(jì)損失。抗凝治療能夠減少心房顫動(dòng)的栓塞發(fā)生率，但由于醫(yī)患雙方對(duì)其出血副作用的擔(dān)心，使用華法林抗凝人數(shù)很少。雖然有新型抗凝藥物的出現(xiàn)，但新型抗凝藥物價(jià)格昂貴，尚無針對(duì)性拮抗劑，在腎功能不全病人使用的局限性以及在瓣膜性心臟病應(yīng)用的局限性，大規(guī)模應(yīng)用新型抗凝藥物并不適合我國國情。相比之下，華法林價(jià)格便宜，每日服藥一次，腎功能不全患者無需調(diào)整劑量，所以華法林在抗凝治療中的地位尚無可替代。為更好地探索我國心房顫動(dòng)患者的華法林使用劑量的個(gè)體化差異，本研究以門診或病房房顫患者為研究對(duì)象，對(duì)CHA2DS2-VASC評(píng)分≥2分以上需要華法林治療的患者進(jìn)行研究。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選擇2012年10月～2013年12月心內(nèi)科門診或病房需要使用華法林抗凝的心房顫動(dòng)患者220例。其中男123例，女97例，年齡35～97歲，平均（57.5±12.5）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）漢族；（2）≥18歲；（3）心房顫動(dòng)患者；（4）CHA2DS2-VASC評(píng)分≥2；（5）簽知情同意書并能夠配合臨床隨訪觀察。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）嚴(yán)重的肝、腎功能不全或甲狀腺疾病；（2）近期手術(shù)史；（3）急性心肌梗死1個(gè)月內(nèi)；（4）活動(dòng)性消化性潰瘍；（5）感染性心內(nèi)膜炎；（6）必須長期服用非甾體類抗炎藥；（7）必須使用試驗(yàn)藥物以外的抗血小板、抗凝藥物及溶栓藥物；（8）惡性腫瘤；（9）處于妊娠期；（10）有血液系統(tǒng)疾病，血小板缺乏癥；（11）不能定期門診復(fù)診條件或治療過程中不能規(guī)律服藥；（12）拒絕隨訪。

1.2方法

由專人收集臨床資料和隨訪登記，與患者簽署書面知情同意書，病例隨機(jī)分為兩組，一組為藥理遺傳學(xué)組（110例）：抽取外周靜脈血2 mL，提取基因組DNA，使用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切核酸酶片段長度的多態(tài)性（PCR-RFLP）給患者進(jìn)行CYP2C9和VKORC1基因型分析，根據(jù)計(jì)算模型（http：//）確定的華法林劑量用藥，并進(jìn)行調(diào)整。另一組為臨床指標(biāo)組（110例）：根據(jù)臨床指標(biāo)確定的華法林劑量用藥。華法林片由齊魯制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字：H37021314，每片2.5 mg。兩組患者在性別、年齡、合并疾病病史及合并用藥等一般資料方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性，見表1。

1.3 CYP2C9和VKORC1基因型分析材料與方法

1.3.1 試劑 基因組DNA抽提試劑盒、Taq DNA聚合酶、10×PCR緩沖液、10 mmol/L dNTPs、25 mmol/L氯化鎂、DNA 標(biāo)記物（采購自加拿大Bio Basic Inc.）；引物由上海生工生物工程有限公司合成提供；限制性內(nèi)切酶AvaⅡ、Nsi I、Msp I及瓊脂糖（均購自美國Promega）。

1.3.2 儀器 HH-W21.420型電熱恒溫水箱（天津泰斯特儀器有限公司）；DYY-6C型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀（北京六一儀器廠）；多功能暗箱式紫外線分析裝置（北京賽百奧公司）；FerroTec基因擴(kuò)增儀（杭州大和公司）；LX-100手掌型離心機(jī)（江蘇海門）。

1.3.3 基因組DNA提取及PCR擴(kuò)增 取外周抗凝血液2 mL，使用基因組DNA抽提試劑盒提取基因組DNA，-20℃保存。PCR反應(yīng)的引物設(shè)計(jì)參考有關(guān)文獻(xiàn)[1-3]，VKORC1基因檢測的正向引物為5’-GCCAGCA-GGAGAGGGAAATA-3’，反向引物為5’-AGTTTGGACTACAGGTGCCT-3’；CYP2C9 *3基因檢測的正向引物為5’-AATAATAATATGCACGAGGTCCAGAGATGC-3’，反向引物為5’-GATACTATGAATTTGG-GACTTC-3’；CYP2C9 *2基因檢測的正向引物為5’TACAAATACAATGAAAATATCATG-3’，反向引物為5’-CTAACAACCAGACTCATAATG-3’。PCR反應(yīng)體系包括基因組DNA 0.2 μg，2.5 mmol/L，dNTPs 4 mL，10×PCR緩沖液5 μL，25 mmol/L的MgCl2 4 μL，10 μmol/L的引物各3 mL，5 u/L Taq聚合酶0.5 μL，加超純水至50 μL。CYP2C9*2反應(yīng)條件為：先94℃預(yù)變性5 min，然后94℃處理45 s，再50℃處理45 s，最后72℃處理1 min，共35個(gè)循環(huán)，接下來72℃延伸5 min；CYP2C9*3的反應(yīng)條件為：先94℃ 預(yù)變性5 min，然后94℃處理45 s，再56℃處理45 s，最后72℃處理30 s，共35個(gè)循環(huán)，接下來72℃延伸5 min；VKORC1-1639G>A的反應(yīng)條件為：先94℃ 預(yù)變性5 min，然后94℃處理45 s，再59℃處理30 s，之后72℃處理30 s，共35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5 min。

1.3.4 限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性（RFLP）分析 取用VKORCl、 CYP2C9 *2、CYP2C9 *3PCR產(chǎn)物各10 μL，然后分別加入限制性內(nèi)切酶AvaⅡ、Msp I、 Nsi I各0.5 μL以及牛血清白蛋白0.2 μL和緩沖液2 μL，再加入超純水至20 μL，37℃水浴4 h。酶切產(chǎn)物在2.5%瓊脂糖凝膠電泳，最后紫外燈下觀察條帶。

1.4 觀察指標(biāo)

觀察兩組患者達(dá)標(biāo)穩(wěn)定時(shí)間（從給予首劑華法林開始到INR值在達(dá)到治療范圍（2～3）且INR值穩(wěn)定所需要的時(shí)間）、藥物調(diào)整的次數(shù)、終點(diǎn)劑量與初始劑量的絕對(duì)差值、抗凝過量的比例（INR初次超過4的比例），并觀察隨訪過程中出血事件的嚴(yán)重程度和發(fā)生率。隨訪時(shí)間約半年。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)所有計(jì)量資料均先進(jìn)行單樣本正態(tài)分布檢驗(yàn)，正態(tài)分布或近似正態(tài)分布資料的組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)量資料數(shù)據(jù)采用（x±s）表示。計(jì)數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

2.1 CYP2C9和VKORC1基因型分析

藥理遺傳學(xué)的方法組共對(duì)110例患者采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切核酸酶片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）進(jìn)行CYP2C9和VKORC1基因型分析，CYP2C9基因具有高度多態(tài)性，在基因編碼區(qū)和非編碼存在許多單堿基突變，最主要的有3種： CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3， CYP2C9：*1型102例占92.7%；CYP2C9：*2型0例占0%；CYP2C9：*3型8例占7.3%。VKORC1發(fā)現(xiàn)有AA、AG、GG三種基因型，VKORC1：AA型81例占73.6%；VKORC1：AG型26例占23.7%；VKORC1：GG型3例占2.7%.

2.2 兩組臨床觀察指標(biāo)的差異

患者隨訪時(shí)間半年，半年后對(duì)兩組患者在達(dá)標(biāo)穩(wěn)定時(shí)間、藥物調(diào)整的次數(shù)、終點(diǎn)劑量與初始劑量的絕對(duì)差值、抗凝過量的比例、嚴(yán)重出血發(fā)生率進(jìn)行觀察和比較，藥理遺傳學(xué)的方法與臨床指標(biāo)組相比，各項(xiàng)指標(biāo)均具有優(yōu)勢，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P

表2 兩組臨床觀察指標(biāo)的差異（x±s）

注：藥理遺傳學(xué)組與臨床指標(biāo)組相比，各觀察指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.3 CYP2C9和VKORC1基因型分析結(jié)果

對(duì)所有抗凝過量和嚴(yán)重出血患者都進(jìn)行CYP2C9和VKORC1基因型分析。出現(xiàn)抗凝過量共20例：基因類型為CYP2C9*1，VKORC1：AA共10例，有4例出現(xiàn)嚴(yán)重出血，基因類型為CYP2C9*3、VKORC1：AA共6例，有3例出現(xiàn)嚴(yán)重出血；基因類型為CYP2C9*1、VKORC1：AG共1例，基因類型為CYP2C9*3、VKORC1：AG共2例，基因類型為CYP2C9*3；VKORC1：GG共1例。10例嚴(yán)重出血患者的VKORC1基因型均是AA。

3 討論

華法林在抗凝治療中的地位尚無可替代。但華法林治療窗很窄，而且用藥的個(gè)體性差異和種族差異也很大，要達(dá)到相同作用效果，最大劑量與最小劑量相差可以達(dá)到10倍以上。目前發(fā)現(xiàn)影響華法林藥效學(xué)的基因主要有2個(gè)，細(xì)胞色素氧化酶P450 2C9（cytochrome P-450 2C9，CYP2C9）和維生素K環(huán)氧化物還原酶復(fù)合體1（VKORC1）。華法林全部由肝臟代謝，CYP2C9是人類肝臟中一種重要藥物代謝酶系統(tǒng)，是華法林代謝最關(guān)鍵的酶，CYP2C9基因具有高度多態(tài)性，在基因編碼區(qū)和非編碼存在許多單堿基突變，其中研究最多也是最主要的有3種，即野生型CYP2C9*1、突變體CYP2C9*2和突變體CYP2C9*3，這幾個(gè)等位基因的多態(tài)性可以影響華法林藥效，導(dǎo)致個(gè)體對(duì)華法林的敏感性不同以及華法林在抗凝治療過程中出血的危險(xiǎn)性，對(duì)華法林的使用劑量密切相關(guān)的兩個(gè)等位基因分別為CYP2C9*2和CYP2C9*3。基因型CYP2C9*2和CYP2C9*3的患者所需的華法林治療劑量小[4，5]。VKORC1是人體內(nèi)維生素K依賴性凝血因子生成的限速酶和關(guān)鍵酶，華法林通過競爭性抑制此酶的作用而達(dá)到抗凝效果。VKORC1發(fā)現(xiàn)有AA、AG、GG三種基因型，AA基因型為華法林劑量敏感型，所需的華法林治療劑量小。AG、GG兩種基因型為華法林劑量抵抗型，所需的華法林治療劑量大[4，5]。納入藥理遺傳學(xué)的方法組的患者CYP2C9和VKORC1基因型見2.1。本研究中發(fā)現(xiàn)：CYP2C9基因型分布CYP2C9*1占92.7%，CYP2C9*2占0%，CYP2C9*3占7.3%。CYP2C9基因型分布以CYP2C9*1為主，與西方人相似[6-10]，可見CYP2C9基因型分布無明顯種族差異。本研究中：VKORC1基因型分布AA占73.6%，AG占23.7%，GG占2.7%。與文獻(xiàn)報(bào)道我國漢族人VKORC1基因型以AA型為主，GG、GA型少見相符[6-9]，而西方人以GG、GA型為主，AA型少見，提示VKORC1基因型存在人種差異[6-9]。已知CYP2C9*1、VKORC1-AA型基因的患者，所需華法林劑量減少，這可部分解釋我國漢族人所需華法林劑量低于西方人群的原因。

本研究通過對(duì)兩組間臨床觀察指標(biāo)（表2）的比較，藥理遺傳學(xué)的方法組與臨床指標(biāo)組比較，穩(wěn)定達(dá)標(biāo)時(shí)間更短，藥物調(diào)整的次數(shù)更少，終點(diǎn)劑量與初始劑量的絕對(duì)差值更小，抗凝過量的比例更低，嚴(yán)重出血事件發(fā)生率更低。藥理遺傳學(xué)的方法組各項(xiàng)指標(biāo)均具有優(yōu)勢，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P

本研究中觀察對(duì)象共發(fā)生抗凝過量例數(shù)20例，抗凝過量患者中基因型表現(xiàn)以CYP2C9*3或VKORC1：AA為多見，抗凝過量患者平均年齡（72.4±9.4）歲，也較大。觀察對(duì)象共發(fā)生9例嚴(yán)重出血，其中嚴(yán)重出血病人中7例抗凝過量，另外2例并未出現(xiàn)抗凝過量，但年齡較大，提示抗凝過量和年齡是出血的重要因素[4，11-14]。嚴(yán)重出血患者的VKORC1基因型均是AA，VKORC1基因型表現(xiàn)為AG、GG的嚴(yán)重出血病例沒有觀察到。CYP2C9*3且VKORC1：AA的患者嚴(yán)重出血發(fā)生率較高，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注此類患者。嚴(yán)重出血患者平均年齡為71.5歲，高于本研究觀察對(duì)象的平均年齡。藥理遺傳學(xué)的方法能夠及早發(fā)現(xiàn)這些出血高危患者，避免嚴(yán)重出血的發(fā)生。這也是藥理遺傳學(xué)的方法指導(dǎo)華法林使用劑量組嚴(yán)重出血發(fā)生率低的主要原因。

基于藥理遺傳學(xué)的方法指導(dǎo)華法林使用劑量比根據(jù)臨床指標(biāo)確定的華法林劑量用藥方法使用劑量推薦劑量更加精確，劑量調(diào)整小而少，能更快到達(dá)INR治療范圍，而且嚴(yán)重出血發(fā)生率低，對(duì)患者更安全，值得推廣應(yīng)用。

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篇（9）

【關(guān)鍵詞】 結(jié)核分支桿菌；尿素酶；耐藥性

Abstract Objective:To determinate drug resistance of tubercle bacillus by employing urease test．Methods: The observed purified mycobacterium were inoculated into the specific autoclaved fluid mycobacterium medium with urea and Phenol Red， and incubated with different concentration of anti-tubercle bacillus drugs until the corresponding negative and positive results became apparent．Results: The results became apparent at 3 to 7 days when mount of the incubated mycobacterium is more than 500 cfu/mL， and 7 to 10 days when mount is less than 500 cfu/ml. To avoid the fake positive samples， the positive mycobacteriums were heating-killed and all tested as negative by urease test．Compared with traditional absolute concentration method， urease test method had no statistic differences (χ2=2.25，P＞0.05)。Conclusion: Urease　testing is a convenient and rapid method to inspect drug resistance of mycobacterium tuberculosis.

Key words Mycobacterium tuberculosis；Urease；Drug resistance

尿素酶是一種胞外酶，多數(shù)細(xì)菌含有該酶，可分解尿素，使環(huán)境變堿，所以，常用尿素酶試驗(yàn)來進(jìn)行細(xì)菌的鑒定。分枝桿菌多數(shù)菌種含有尿素酶，如結(jié)核分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌、胃分枝桿菌均為陽性。而這些分枝桿菌是臨床結(jié)核病的主要病原體。

尿素酶的存在是結(jié)核菌具有活性的標(biāo)志之一，如果在培養(yǎng)中加入某種藥，控制了該酶的產(chǎn)生，則說明某種藥物對(duì)結(jié)核分枝桿菌有殺菌效果。否則尿素酶繼續(xù)產(chǎn)生，利用該機(jī)制我們設(shè)計(jì)了結(jié)核分枝桿菌耐藥性的尿素酶測定試驗(yàn)。現(xiàn)將我們的研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種：本室保存的耐藥結(jié)核分枝桿菌菌株，臨床標(biāo)本常規(guī)處理后，分離培養(yǎng)鑒定結(jié)核分枝桿菌菌株。對(duì)照菌株購自中國生物藥物鑒定所細(xì)菌室（菌株編號(hào)H37RV）。

1.1.2 培養(yǎng)基：絕對(duì)濃度法采用豆浸液改良羅氏培養(yǎng)基［1］；尿素酶法采用含尿素和酚紅指示劑的結(jié)核分枝桿菌液體培養(yǎng)基（蘇通氏培養(yǎng)基）。

1.1.3 抗癆藥物：14種抗癆藥物均購自上海醫(yī)藥集團(tuán)有限責(zé)任公司信宜制藥總廠，其中利福平(RFP)、 異煙肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)、 利福定 (RFD)、利福噴丁(RFPD)、吡嗪酰胺（PAZ）、立刻肺疾、卷曲霉素(CPM)、環(huán)絲氨酸(CS)取得該廠的純品藥物；而卡那霉素(KM) 、對(duì)氨柳酸（PAS）、丁胺卡那、奧復(fù)星、鏈霉素(SM) 使用該廠的注射用瓶裝藥，取得了該廠此批藥物的藥物效價(jià)，并嚴(yán)格按照結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程中，抗結(jié)核藥物溶液配制及稀釋的方法進(jìn)行計(jì)量的折算［1］。

1.2 方法

1.2.1 含尿素結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基的制備：成分：天門冬酸4.0 g，枸櫞酸2.0 g， k2HpO4 0.5 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，0.1%酚紅25 mL，枸櫞酸鐵銨0.05 g，甘油 60 mL，蒸餾水1 000 mL，尿素 12 g(0.12%)［1］，另外采用固體方法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)，培養(yǎng)基可選擇改良羅氏培養(yǎng)基。其制備方法略有不同。

制備方法：將上述成分混合于蒸餾水中，加溫溶解，調(diào)pH為6.8，過濾，分裝三角燒瓶，每瓶裝99 mL，121.3 ℃15 min，高壓滅菌，4 ℃～8 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 瓊脂絕對(duì)濃度法培養(yǎng)基的制備與藥物的濃度：絕對(duì)濃度法嚴(yán)格根按照中國防癆協(xié)會(huì)，結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程的方法操作［1］。

1.2.3 試驗(yàn)菌液的配制：將試驗(yàn)菌接種于豆浸液結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基培養(yǎng)20 d，待生長至培養(yǎng)基斜面的1/3以上時(shí)，刮取菌落，粘磨，并用硫酸鋇比濁管比濁，用Teen-80生理鹽水配成5×105/mL～5×106/mL菌懸液，采用10倍遞次稀釋，待用。

1.2.4 藥敏試驗(yàn)的操作方法：將分離培養(yǎng)、鑒定，并稀釋配置成5×103 cfu/mL的濃度的結(jié)核分枝桿菌，分別接種在已分裝好的，含有藥物的14管培養(yǎng)基中，每管接種0.2 mL，使每管培養(yǎng)基中的細(xì)菌濃度約為500 cfu/mL，每種藥物分別作高低兩種濃度的試驗(yàn)，設(shè)空白對(duì)照各1管， 尿素酶陽性菌株對(duì)照1管，37 ℃培養(yǎng)7 d～10 d， 以陽性菌株的培養(yǎng)液呈現(xiàn)紅色，為終止培養(yǎng)的判定終點(diǎn)。同時(shí)用傳統(tǒng)結(jié)核分枝桿菌耐藥測定法-絕對(duì)濃度法，進(jìn)行接種作為對(duì)照，觀測其該方法（尿素酶法）與傳統(tǒng)法在耐藥性檢測中的相符性或有無顯著的差異。

1.2.5 結(jié)果判斷：培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色為耐藥，培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色為敏感，培養(yǎng)基呈現(xiàn)淡紅色為中度敏感（或中度耐藥）。

1.2.6 質(zhì)控方式：每次均用結(jié)核分枝桿菌H37RV藥物敏感株作對(duì)照，進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.2.7 數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)：采用配對(duì)資料的卡方檢驗(yàn)以及符合率的計(jì)算。

2 結(jié)果

兩種方法檢測臨床鑒定結(jié)核分枝桿菌耐藥性的結(jié)果分析，見表1～表4。表1 兩種方法檢測結(jié)核分枝桿菌對(duì)14種抗癆藥物耐藥結(jié)果從表1的結(jié)果分析，尿素酶法檢出耐藥菌株173株，總耐藥率24.3%；傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法檢出耐藥菌株180株，總耐藥率25.7%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，尿素酶檢測法與傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法，在對(duì)上述結(jié)核分枝桿菌的耐藥性檢測中，差別無顯著性（χ2=2.25，P＞0.10）。說明尿素酶法在對(duì)結(jié)核分枝桿菌的耐藥性檢測方面具有可靠性，其檢出結(jié)果與傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法具有可比性，兩種方法無顯著性差異。表2 兩種方法檢測167株結(jié)核分枝桿菌對(duì)利福定耐藥性結(jié)果的比較表2的結(jié)果分析若以傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法檢測的結(jié)果為判斷標(biāo)準(zhǔn)，則尿素酶法檢測RFD耐藥性符合率為96.4%。 表3 尿素酶法檢測50株對(duì)吡嗪酰胺耐藥的結(jié)核分枝桿菌重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果比較

對(duì)臨床分離鑒定的并用絕對(duì)濃度法測定的50株耐吡嗪酰胺的結(jié)核分枝桿菌，用尿素酶進(jìn)行了耐吡嗪酰胺的重復(fù)性試驗(yàn)，首次檢測耐藥菌株數(shù)48株，敏感2株；再次檢測，敏感菌株為1株，耐藥菌株49株，符合率94%（47/50）。

武延雋等.利用尿素酶試驗(yàn)測定結(jié)核分支桿菌耐藥性的方法學(xué)研究表4 兩種方法檢測5種規(guī)定必作藥敏結(jié)果

藥物尿素酶法測定結(jié)果傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法測定結(jié)果敏感株耐藥株符合率(%)異煙肼（n=50）敏感株350 耐藥株015100乙胺丁醇（n=50）敏感株450 耐藥株05100鏈霉素（n=50）敏感株52 耐藥株04396對(duì)氨柳酸（n=50）敏感株355 耐藥株01090利福平（n=50）敏感株350 耐藥株51090

用兩種方法檢測50株臨床分離鑒定的結(jié)核分支桿菌對(duì)5種必作藥物的耐藥性，結(jié)果見表4。檢測異煙肼藥敏結(jié)果相符50株（100%）。不符0株（0%）；檢測乙胺丁醇藥敏結(jié)果相符50株（100%），不符0株（0%）；檢測鏈霉素藥敏結(jié)果相符48株（96%），不符2株（4%）；檢測對(duì)氨柳酸藥敏結(jié)果相符45株（90%），不符5株（10%）；檢測利福平藥敏結(jié)果相符45株（90%），不符5株（10%）。

3 討論

尿素酶試驗(yàn)是鑒定性試驗(yàn)，應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌的耐藥性檢測，主要是通過恢復(fù)性試驗(yàn)，觀測尿素酶檢測結(jié)果的敏感試驗(yàn)管和耐藥試驗(yàn)管中細(xì)菌的存活情況，本文結(jié)果顯示，在耐藥試驗(yàn)管中的結(jié)核分枝桿菌，在無藥的豆浸液羅氏培養(yǎng)基中生長，而敏感試驗(yàn)管中的結(jié)核分枝桿菌在該培養(yǎng)基中不生長。特異試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，處死菌尿素酶試驗(yàn)均為陰性，而未處死菌均為陽性，表明通過尿素酶方法所檢出的藥敏試驗(yàn)的特異性。

在對(duì)結(jié)核分支桿菌的耐藥性檢測中，用兩種方法檢測異煙肼、乙胺丁醇相符率為100%；檢測鏈霉素相符率為96%；檢測PAS和利福平相符率90%。尿素酶檢測法與傳統(tǒng)絕對(duì)濃度法差別無顯著性（χ2=2.25，P＞0.10）；說明尿素酶法與傳統(tǒng)的絕對(duì)濃度法檢出的結(jié)果具有可比性。然而，尿素酶法是利用細(xì)菌生理狀態(tài)的改變，來確定細(xì)菌對(duì)某種藥物的敏感性的，這種方法比絕對(duì)濃度法時(shí)間短，絕對(duì)濃度法的結(jié)果需要30 d的時(shí)間，而尿素酶法最長時(shí)間10 d；尿素酶法在培養(yǎng)基的制備，具體的操作上都比較容易，有利于臨床推廣使用。

應(yīng)當(dāng)指出的是：因有些分枝桿菌的尿素酶均為陰性，如戈氏分枝桿菌，蟾蜍分支桿菌，鳥分枝桿菌以及胞內(nèi)分枝桿菌，尿素酶方法不能用于這些分枝桿菌株的耐藥性的檢測；該方法的靈敏度與噬菌體生物裂解法有一定的近似性，在500 cfu/mL時(shí)以上時(shí)，結(jié)果在3 d內(nèi)顯現(xiàn);在500 cfu/mL內(nèi)時(shí)，其結(jié)果在培養(yǎng)7 d～10 d內(nèi)顯現(xiàn)，所以當(dāng)標(biāo)本中菌數(shù)較少時(shí)一般不要做直接的尿素酶法的耐藥性測定，直接對(duì)標(biāo)本中的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行耐藥性測定的條件有待進(jìn)一步研究；該試驗(yàn)所用的培養(yǎng)基的pH值對(duì)試驗(yàn)的結(jié)果有一定的影響，所以用弱酸弱堿處理過的試驗(yàn)菌一定要進(jìn)行pH值的調(diào)整，應(yīng)將pH值調(diào)整至6.8，否則影響試驗(yàn)結(jié)果。在試驗(yàn)所用的培養(yǎng)基中不可用天門冬素（L-天門冬酰胺），有該藥的培養(yǎng)基經(jīng)高壓消毒滅菌后L-天門冬酰胺可破壞產(chǎn)生胺可使培養(yǎng)基的pH值改變，顯示紅色。

總之，盡管有多種因素可影響該試驗(yàn)的結(jié)果，但因本方法操作簡便，省時(shí)，有一定的特異性和敏感性，所以將對(duì)結(jié)核分枝桿菌耐藥性檢測提供一種新方法。

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篇（10）

1.遙感專業(yè)的特點(diǎn)與本課程內(nèi)容分析。遙感專業(yè)屬于測繪類大學(xué)科方向，主要培養(yǎng)具備遙感科學(xué)技術(shù)與工程的基本理論、方法和技能的各層次專業(yè)人才。要求學(xué)生能夠熟練掌握衛(wèi)星遙感平臺(tái)、傳感器技術(shù)、遙感信息獲取與數(shù)據(jù)處理、多傳感器數(shù)據(jù)匹配和融合、圖像自動(dòng)解譯技術(shù)等基本技術(shù)與方法，能夠在城市規(guī)劃、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、水利、地質(zhì)、測繪等各類遙感領(lǐng)域，從事遙感電子設(shè)備與系統(tǒng)研制、應(yīng)用系統(tǒng)和系統(tǒng)集成的建設(shè)與開發(fā)工作[1]。因此，對(duì)遙感專業(yè)的學(xué)生來說，程序設(shè)計(jì)是一門必備的技能。針對(duì)面向?qū)ο蟪绦蛘n程的教學(xué)任務(wù)量和教學(xué)特點(diǎn)，我校在制定遙感專業(yè)教學(xué)大綱中安排學(xué)生從一年級(jí)開始學(xué)習(xí)程序設(shè)計(jì)課程，分上下兩個(gè)學(xué)期學(xué)完。課程內(nèi)容主要包括[2]：①程序設(shè)計(jì)基本概念與語法，包括數(shù)組、函數(shù)、類和對(duì)象、繼承與派生、多態(tài)性、輸入輸出流、異常處理等，以及C++14標(biāo)準(zhǔn)中包含的模版、泛型、匿名方法、lambda表達(dá)式、新型智能指針等。②程序設(shè)計(jì)方法，包括結(jié)構(gòu)化程序設(shè)計(jì)和面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)。面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)的出發(fā)點(diǎn)之一就是彌補(bǔ)結(jié)構(gòu)化程序設(shè)計(jì)中的一些缺點(diǎn)，但其可以使用結(jié)構(gòu)化程序設(shè)計(jì)中的函數(shù)、數(shù)組等基本理論。本課程主要要求學(xué)生學(xué)習(xí)和掌握面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)的思想，同時(shí)要求學(xué)生采用規(guī)范的程序設(shè)計(jì)風(fēng)格，形成良好的程序設(shè)計(jì)素養(yǎng)。③程序調(diào)試技巧。④專業(yè)問題的分析與程序轉(zhuǎn)化能力。

2.教學(xué)目的。教師通過理論和實(shí)踐教學(xué)，使學(xué)生掌握結(jié)構(gòu)化程序設(shè)計(jì)方法和面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)方法，了解面向?qū)ο蟮幕靖拍詈褪褂妹嫦驅(qū)ο蠹夹g(shù)進(jìn)行程序設(shè)計(jì)的基本思想，學(xué)會(huì)采用面向?qū)ο蟮姆椒ㄟM(jìn)行問題分析，能夠熟練運(yùn)用C++語言解決一般問題，培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手實(shí)踐和科研創(chuàng)新能力，為大型應(yīng)用軟件設(shè)計(jì)與開發(fā)打下良好的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。通過本課程的教學(xué)，希望學(xué)生能夠達(dá)到的能力[3]包括：①程序編寫與調(diào)試能力，熟練掌握VC++的編輯調(diào)試工具，能夠快速編寫程序代碼；掌握程序排錯(cuò)的基本方法，能夠獨(dú)立快速進(jìn)行程序調(diào)試。②專業(yè)問題的分析與程序轉(zhuǎn)化能力，對(duì)實(shí)際專業(yè)對(duì)象和問題進(jìn)行分析與抽象，設(shè)計(jì)出結(jié)構(gòu)合理的對(duì)象關(guān)系圖，并能進(jìn)行求解。③創(chuàng)新能力，能夠獨(dú)立思考和深入鉆研，善于對(duì)所學(xué)知識(shí)，進(jìn)行梳理、概括、歸納總結(jié)，給出合理解決方案；能夠獨(dú)立閱讀參考代碼和資料，自我擴(kuò)充知識(shí)結(jié)構(gòu)。

二、普遍存在的問題及原因

1.學(xué)習(xí)中存在的問題。在學(xué)習(xí)過程中，大一學(xué)生們普遍反映該門課程的概念和知識(shí)點(diǎn)太多，課程內(nèi)容的風(fēng)格與其他課程差別很大，不易理解，一些學(xué)生甚至對(duì)編程產(chǎn)生了畏懼情緒，一步跟不上，步步跟不上。學(xué)生們學(xué)習(xí)過程中所遇到的困難具體來說包括以下幾個(gè)方面[4]：①學(xué)生對(duì)遙感與面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)的關(guān)系不清楚，學(xué)習(xí)的熱情不高，比較茫然。②知識(shí)點(diǎn)具有一定難度，部分學(xué)生不注重對(duì)編程基礎(chǔ)知識(shí)的掌握。③本課程是理論教學(xué)與上機(jī)實(shí)踐相結(jié)合，教學(xué)內(nèi)容多、學(xué)習(xí)任務(wù)量重。④C++中蘊(yùn)含的計(jì)算思維方式不容易掌握[5]。部分學(xué)生在學(xué)習(xí)了本課程后，不善于從計(jì)算機(jī)語言的角度去思考問題。⑤編程環(huán)境VC++相對(duì)比較復(fù)雜，不太容易快速掌握。

2.教學(xué)中存在的問題。許多老師具有多年的程序設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)，容易慣性地認(rèn)為所講授的知識(shí)點(diǎn)比較容易，從而忽視了學(xué)生的個(gè)性化感受，再加上缺乏有效溝通，最終導(dǎo)致老師講臺(tái)上講的很有激情，學(xué)生在下面一臉茫然。具體來說有如下問題：①?zèng)]有激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。傳統(tǒng)的“以教師為中心、學(xué)生被動(dòng)接受知識(shí)”的“填鴨式”教學(xué)方法忽略了學(xué)生學(xué)習(xí)程序設(shè)計(jì)的主動(dòng)性，從而培養(yǎng)不了學(xué)生的創(chuàng)造性思維和探索精神，使得原本就不吸引學(xué)生的課堂變得更加枯燥無味，大大降低了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣[6]。②沒有因材施教。大一新生的計(jì)算機(jī)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握程度大不相同，在教學(xué)中若進(jìn)度偏快，就有部分學(xué)生無法跟上老師的節(jié)奏，影響學(xué)習(xí)的積極性；如果講的偏慢，會(huì)在整體上影響教學(xué)進(jìn)度。

三、以能力培養(yǎng)為導(dǎo)向的教學(xué)方法研究

遙感專業(yè)開設(shè)C++面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)課程，目的并不是要每個(gè)學(xué)生將來畢業(yè)了都能夠勝任程序員的工作[7]，而是讓他們學(xué)會(huì)利用程序設(shè)計(jì)的思想和工具，具備解決專業(yè)問題的能力和潛力。針對(duì)以上對(duì)教學(xué)過程中存在問題的分析，現(xiàn)從以下幾個(gè)方面提出以能力培養(yǎng)為導(dǎo)向的教學(xué)方法，力求提高教學(xué)效果。

1.活躍課堂氣氛，激發(fā)學(xué)習(xí)興趣。表面上看起來，面向程序設(shè)計(jì)課程本身是一門很枯燥的課，課程內(nèi)容不是概念就是代碼，課程中很多內(nèi)容又不容易被學(xué)生理解。在教學(xué)中如果不和學(xué)生互動(dòng)，學(xué)生只是被動(dòng)的學(xué)習(xí)，那么他們不但在學(xué)習(xí)過程中對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解很困難，而且其學(xué)習(xí)的成果也不會(huì)達(dá)到預(yù)期的目標(biāo)。在C++的教學(xué)過程中，最理想的狀態(tài)就是，學(xué)生一直都能保持一種亢奮的狀態(tài)，做到“樂于學(xué)、勤于練、善于思”。針對(duì)這種情況，教師可以采取以下幾種手段，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣：①從簡到難，穩(wěn)扎穩(wěn)打。C++的知識(shí)點(diǎn)的難度是不一樣的，在課堂上和上級(jí)實(shí)習(xí)中，給學(xué)生以適當(dāng)?shù)奶崾荆寣W(xué)生每一步都能看到解決問題的希望。②課堂上，對(duì)重點(diǎn)、難度知識(shí)點(diǎn)要盡量形象、生動(dòng)地進(jìn)行講解，有時(shí)可以借助打比方、講故事，也可引入U(xiǎn)ML或Visio繪圖來輔助。③對(duì)容易混淆的概念，集中起來進(jìn)行類比講授。④引導(dǎo)學(xué)生知其然，更要知其所以然。

2.精心設(shè)計(jì)實(shí)習(xí)題目，全面覆蓋專業(yè)問題。面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的課程，通過實(shí)踐來加深對(duì)課程中理論知識(shí)的理解。因此，在實(shí)習(xí)內(nèi)容的安排上，既要重視理論知識(shí)的重現(xiàn)，又要注重學(xué)生解決問題實(shí)際能力的培養(yǎng)；既要考慮學(xué)生的總體學(xué)習(xí)情況，又考慮學(xué)生的個(gè)體差異；既要考慮專業(yè)知識(shí)的覆蓋，又要增加趣味性，并為學(xué)生提供一個(gè)發(fā)揮想象的空間。每個(gè)實(shí)驗(yàn)都要求學(xué)生自己進(jìn)行設(shè)計(jì)和調(diào)試，老師在其中只是起引導(dǎo)和輔導(dǎo)作用。通過多次實(shí)踐，學(xué)生不但可以對(duì)所學(xué)的內(nèi)容進(jìn)行鞏固，而且還可以在其基礎(chǔ)上創(chuàng)新。著眼于學(xué)科體系內(nèi)的課程銜接，可從以下幾方面來考慮實(shí)習(xí)題目的設(shè)計(jì)：①從大一所學(xué)的高等代數(shù)中出一些關(guān)于矩陣、行列式運(yùn)算方面的問題進(jìn)行訓(xùn)練。②從遙感專業(yè)內(nèi)容本身尋找題目，諸如遙感圖像處理、影像顯示和影像分類等問題，來讓學(xué)生體會(huì)C++解決專業(yè)問題的巨大威力。③通過設(shè)置課程設(shè)計(jì)題目，引導(dǎo)學(xué)生既要善于獨(dú)立思考，又要學(xué)會(huì)分工協(xié)作。C++語言基于面向?qū)ο笏枷耄瑹o論是微粒度的代碼級(jí)的設(shè)計(jì)模式，還是軟件模塊的設(shè)計(jì)組織，都能很輕松地應(yīng)對(duì)。指導(dǎo)學(xué)生在大模塊軟件設(shè)計(jì)編寫過程中，學(xué)會(huì)團(tuán)隊(duì)合作，同時(shí)在自己的模塊中精益求精。